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植物組織培養(yǎng)的流程

瀏覽次數(shù):5730 發(fā)布日期:2014-10-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

一個完整的植物組織培養(yǎng)過程一般包括以下幾個步驟:
(1)準備階段

     查閱相關文獻,根據已成功培養(yǎng)的相近植物資料,結合實際制訂出切實可行的培養(yǎng)方案。然后根據實驗方案配制適當?shù)幕瘜W消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基,并經高壓滅菌或過濾除菌后備用。
(2)外植體選擇與消毒
     選擇合適的部位作為外植體,采回后經過適當?shù)念A處理,然后進行消毒處理。將消毒后的外植體在無菌條件下切割成一定大小的小塊,或剝離出莖尖,挑出花藥,接種到初代培養(yǎng)基上。
(3)初代培養(yǎng)
     接種后的材料置于培養(yǎng)室或光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),促使外植體中已分化的細胞脫分化形成愈傷組織,或頂芽、腋芽直接萌發(fā)形成芽。然后將愈傷組織轉移到分化培養(yǎng)基分化成不同的器官原基或形成胚狀體,最后發(fā)育形成再生植株。
(4)繼代培養(yǎng)
     分化形成的芽、原球莖數(shù)量有限,采用適當?shù)睦^代培養(yǎng)基經多次切割轉接。當芽苗繁殖到一定數(shù)量后,再將一部分用于壯苗生根,另一部分保存或繼續(xù)擴繁。進行脫毒苗培養(yǎng)的需提前進行病毒檢測。
(5)生根培養(yǎng)
     剛形成的芽苗往往比較弱小,多數(shù)無根,此時可降低細胞分裂素濃度或不加,提高生長素濃度,促進小苗生根,提高其健壯度。
(6)煉苗移栽  
     選擇生長健壯的生根苗進行室外煉苗,待苗適應外部環(huán)境后,再移栽到疏松透氣的基質中,注意保溫、保濕、遮蔭,防止病蟲危害。當組培苗完全成活并生長一定大小后,即可移向大田用于生產。
如:莖尖→表面消毒→接種誘導培養(yǎng)基→莖尖生長→病毒檢測鑒定→培養(yǎng)無根小植株→培養(yǎng)生根→完整小植株→煉苗20-25天→移栽成活。
常規(guī)情況下詳細的生產流程圖如下:


 
    對不同的品種流程會略有差異,如進行果樹育苗還需進行嫁接等操作流程,但對組培工廠化育苗而言,一般可根據上面的流程圖來安排各項作業(yè),只有相互銜接好、配合好,才能提高生產效益。

植物組培用的培養(yǎng)基http:///tools/search.asp?kw2=%C5%E0%D1%F8%BB%F9&tn=5

凝膠劑http:///cn/tech/2014/6-17/tech_63577426.htm

抗生素http:///cn/tech/2014/6-10/tech_39892976.htm

廣譜性抑菌劑PPMhttp:///cn/tech/2014/3-4/tech_26106138.htm

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