THP-1的培養(yǎng)方法

培養(yǎng)條件：
RPMI-1640＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗

到貨處理
用75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
1.不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞放入 37℃培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.通過離心的方式收集細(xì)胞，然后將細(xì)胞沉淀加入5-8ml的完全培養(yǎng)基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

培養(yǎng)時(shí)的注意技巧
1.換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時(shí)左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基，然后加入3ml的新鮮完全培養(yǎng)基，混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.如果細(xì)胞密度比較稀，培養(yǎng)基沒有明顯變化，可以加入500ul的FBS混勻后，豎著培養(yǎng)。
3.傳代時(shí)，先按照換液步驟處理，吸掉3ml左右培養(yǎng)基后，加入10ml的新鮮完全培養(yǎng)基，混勻后分2個(gè)T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次，以去除一些死細(xì)胞。
5.該細(xì)胞比較脆弱，培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察，以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。
6.該細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境比較敏感，需使用較好的血清培養(yǎng)。
7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng)。

訂購建議：
為避免收到細(xì)胞后離心處理，推薦使用15ml離心管發(fā)貨，到貨后直接分裝到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶即可。