細(xì)胞電轉(zhuǎn)染實驗效率低的原因可能涉及多個方面，具體如下：

首先，細(xì)胞的狀態(tài)是影響轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵因素。如果細(xì)胞密度過低或過高，都可能對轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生負(fù)面影響。細(xì)胞密度過低時，細(xì)胞過于稀疏，轉(zhuǎn)染試劑難以充分接觸細(xì)胞；而細(xì)胞密度過高時，轉(zhuǎn)染試劑與細(xì)胞的接觸和吸收可能受阻。此外，如果細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)或非常規(guī)生長狀態(tài)，如細(xì)胞凋亡或細(xì)胞周期靜止期，它們的轉(zhuǎn)染效率也可能會受到影響。

其次，轉(zhuǎn)染試劑的選擇和適配性也至關(guān)重要。不同類型的細(xì)胞需要使用不同的轉(zhuǎn)染試劑，選擇不合適的轉(zhuǎn)染試劑可能導(dǎo)致效率低下。同時，轉(zhuǎn)染試劑與細(xì)胞的適配性不佳也可能影響轉(zhuǎn)染效率，試劑無法很好地與細(xì)胞結(jié)合，從而影響轉(zhuǎn)染效果。

再者，轉(zhuǎn)染的DNA或RNA的質(zhì)量和濃度也會影響轉(zhuǎn)染效率。如果質(zhì)粒DNA的純度不夠高，其中可能含有雜質(zhì)或其他DNA，這些雜質(zhì)可能干擾轉(zhuǎn)染試劑的作用或?qū)��?xì)胞產(chǎn)生毒性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率降低。同樣，如果質(zhì)粒DNA的量不足，轉(zhuǎn)染試劑與細(xì)胞的接觸可能不充分，從而影響轉(zhuǎn)染效率。

此外，實驗條件和操作方法的合規(guī)性也是影響轉(zhuǎn)染效率的重要因素。如果實驗條件不符合標(biāo)準(zhǔn)，或者操作方法不規(guī)范，都可能導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降。

綜上所述，細(xì)胞電轉(zhuǎn)染實驗效率低的原因多種多樣，可能涉及細(xì)胞狀態(tài)、轉(zhuǎn)染試劑的選擇和適配性、轉(zhuǎn)染的DNA或RNA的質(zhì)量和濃度，以及實驗條件和操作方法的合規(guī)性等多個方面。為了提高轉(zhuǎn)染效率，需要綜合考慮這些因素，并采取相應(yīng)的措施進(jìn)行優(yōu)化。

改進(jìn)建議

1. 場強(qiáng)要合適

適當(dāng)?shù)膱龅貜?qiáng)度對于電轉(zhuǎn)染試驗非常重要。場地強(qiáng)度不宜過高，過高會增加細(xì)胞死亡率；不能太低。太低不能增加膜的滲透性或在膜上形成小孔。不同的細(xì)胞系有不同的最佳場強(qiáng)值，所轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的最佳場強(qiáng)值應(yīng)在試驗前確定。

2. 細(xì)胞狀態(tài)要好

在大多數(shù)生長期(15代以內(nèi)，傳代后2d)，一般選擇用于電轉(zhuǎn)的細(xì)胞。由于大多數(shù)生長期細(xì)胞分裂旺盛，表面結(jié)構(gòu)致密性比穩(wěn)定期細(xì)胞差。電轉(zhuǎn)后，細(xì)胞膜恢復(fù)力強(qiáng)，有絲分裂期細(xì)胞更容易接受外源DNA.

3. 質(zhì)粒質(zhì)量要好

首先要選擇純度高的質(zhì)粒，DNA／RNA應(yīng)該是超純的(A260／A280>1．第二，不應(yīng)含有內(nèi)毒素，質(zhì)粒應(yīng)溶于雙蒸水而非TE緩沖溶液。另外，DNA濃度不宜過高。

4. 選擇合適的電轉(zhuǎn)染試劑

電擊會對細(xì)胞造成一定程度的傷害。應(yīng)注意轉(zhuǎn)染試劑的選擇。應(yīng)選擇威尼德生物科技等具有細(xì)胞膜修復(fù)成分的電轉(zhuǎn)染試劑。-E，可以最大限度地減少電擊對細(xì)胞的傷害。