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MSC間充質干細胞培養注意事項及實驗數據分享

瀏覽次數:1866 發布日期:2024-3-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
MSC:間充質干細胞,是一群貼壁生長、形態類似于成纖維細胞的多能成體干細胞,存在于臍帶、骨髓和脂肪組織等多種組織中,并且可以分化成多種不同的組織。
 

Q:為什么培養的MSC細胞會卷邊?
A:細胞的鋪瓶密度不均勻,把培養瓶放到培養箱的時候可以按照十字法輕輕晃一下,更均勻。

Q:為什么不同品牌的培養基培養效果不一樣?
A:首先,各個品牌的試劑盒使用說明和成分都不同程度有所差異,部分國產品牌的鋪瓶密度在1E4-2E4個/cm2,需要大的細胞起始量。

同立海源生物的MSC試劑盒套裝建議的鋪瓶密度按照不同的傳代數,P1-P3代4E3-6E3個/cm2,P3-P5代6E3-8E3個/cm2。建議的鋪瓶體積:5mL/T25瓶, 13mL/T75瓶, 30mL/T175瓶。

Q:添加物有絮狀物怎么處理?
A:可以離心去除,3000rpm, 5min

Q:關于MSC培養的其它注意事項?
A:添加物不要反復凍融。培養基提前放到室溫。

實驗數據分享
1、樣本:凍存的P1代MSC細胞;
2、實驗組:同立海源生物MSC無血清培養基;對照組:國產競品MSC無血清培養基;
3、傳代時間:72h;
4、鋪瓶密度:P3代以前,4E3-6E3個/cm2,P3代以后,8E3個/cm2;
5、結論:同立海源生物MSC無血清培養基較競品有更優異的擴增倍數。P2-P3代同立海源生物的擴增倍數約是競品的3倍(同立海源生物擴增12倍,競品擴增4倍)。相同的鋪瓶密度等實驗條件下,同立海源生物收獲的細胞數更多,擴增倍數更高,為客戶節約更多成本。
 

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圖1 MSC擴增倍數對比
 

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圖2 MSC細胞狀態
 


臨床研究

  • 在肝炎、肝硬化、肝衰竭等肝病的患者中,MSC可以改善免疫調節,可激活不同的信號轉導途徑調節免疫細胞功能,維持免疫抑制,進而抑制肝臟疾病的發生和發展。

  • 進行疾病治療研究,MSC治療激素耐藥的急性GVHD已經進入臨床試驗研究。


干細胞藥物
至今有1500+關于MSCs的臨床試驗在Clinicaltrials.gov上注冊,目前全球范圍內批準的符合藥品定義的MSCs產品約10種,適應癥包括移植物抗宿主病等。
 

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AMMS®MSC試劑盒套裝2.0適用于原代及凍存間充質干細胞的培養擴增,成分明確,穩定性高,操作簡單,無需添加谷氨酰胺,無血清,無異源成分,擴增效率高,表型穩定。該產品已通過美國FDA的DMF備案(035589),干細胞藥物臨床實驗最佳選擇。

關于同立海源
北京同立海源生物科技有限公司,專注細胞和基因治療(CGT)GMP級原料試劑研發及生產,為CGT用戶提供產品與服務的整體解決方案。產品涉及細胞分選磁珠試劑、真核/原核重組蛋白、無血清培養基、細胞培養試劑盒等。

公司建有3200m2的研發實驗室及GMP級潔凈車間,包括細胞分選磁珠開發平臺、真核與原核蛋白表達工程平臺、無血清培養基開發平臺,通過ISO13485和ISO9001雙質量體系認證,部分產品已獲美國FDA DMF

發布者:北京同立海源生物科技有限公司
聯系電話:4000105556
E-mail:cuilimei@seafrom.cn

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