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活體影像系統在揭示調花型伸長形狀新機制的應用

瀏覽次數:1476 發布日期:2024-2-5  來源:公眾號:伯托科技生物分析

   202401月,英國John Innes Centre細胞與發育生物學系Laila Moubayidin教授團隊在著名研究科學期刊Nature Plants上發表了題為“O-glycosylation of the transcription factor SPATULA promotes style development in Arabidopsis. ”的研究論文,揭示了一種協調花型伸長和形狀的新機制。

O-連接的β-N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)和O-巖藻糖是兩種基于糖的翻譯后修飾,其在植物信號傳導和轉錄調控中的機制作用仍然很大程度上未知。在這里,研究人員研究了擬南芥的兩種 O-糖基轉移酶SPINDLY(SPY)和SECRET AGENT(SEC)在植物雌性生殖器官頂端的形態發生過程中如何促進基本螺旋-環-螺旋轉錄因子SPATULA(SPT)的活性 。SPY和SEC分別通過連接O-巖藻糖和O-GlcNAc在體內和體外修飾SPT的氨基末端殘基。這種翻譯后調節不會影響SPT同二聚化和異二聚化事件,盡管它增強了SPT對激酶 PONOID 基因座的親和力及其轉錄抑制。研究結果提供了O-GlcNAc和O-巖藻糖對植物轉錄因子活性影響的機制示例,并揭示了SEC和SPY在協調花型伸長和形狀中以前未被認識到的作用。 

圖 1. SEC DEX 誘導 RNAi 構建體的工作原理示意圖


圖2. SPT直接與SEC和 SPY相互作用。
 

a,在煙葉中進行的Co-IP實驗顯示全長SPT-FLAG蛋白與全長SEC-HA(左)或SPY-HA(右)重組蛋白進行免疫共沉淀。

b,在煙葉中進行的裂解熒光素酶測定顯示全長SPT-nLuc與SEC-cLuc(左)和SPY-cLuc(右)之間的相互作用。

c,Y2H測定顯示SPT結構域(左)足以與全長SPY和SEC蛋白相互作用。在 SD-LW 培養基(中)上選擇陽性共轉化子,并在 SD-LWHA、2.5 mM 3-AT 培養基(右)上生長以確定強相互作用。

*:本文獻中使用了德國伯托科技公司的活體影像系統Berthold NightOWL

文章鏈接:

https://doi.org/10.1038/s41477-023-01617-4      

發布者:伯托科技生物分析中國代表處
聯系電話:025-84729068-831
E-mail:info@berthold.cn

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