基因治療，也稱為細胞和基因治療(Cell and GeneTherapy)，是一種利用基因治療載體將外源治療性基因轉導至細胞，再通過外源基因的轉錄和翻譯，改變細胞原有基因表達從而達到治療疾病的目的。目前，國內基于基因治療的生產工藝主要涉及兩個方向，第一類即基于溶瘤病毒進行相關藥物開發，第二類即基于質粒/病毒載體介導的基因療法。
 

溶瘤病毒不僅可以發揮直接由病毒介導的腫瘤細胞殺傷功能，也能通過破壞腫瘤血管系統從而達到間接殺傷腫瘤的目的。對于基因治療中的腺病毒AAV載體，其能夠長期存在于未分裂、最終分化的細胞群中而不被細胞當做外源DNA降解，從而達到藥物遞送的作用。慢病毒LV載體則可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達目的序列的效果。
 

目前已上市的藥物中以AAV作為載體的代表性藥物例如諾華治療脊髓性肌萎縮癥（SMA）的Zolgensma，上市以來也取得了顯著反向，商業化較為成功。接下來就讓我們來看一下不同病毒的生產工藝吧！

01

溶瘤病毒生產工藝

病毒工藝開流程
 

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質粒/病毒載體生產工藝

一 慢病毒質粒構建流程
 

二 腺病毒質粒構建流程
 

三 腺相關病毒質粒構建
 

在上游細胞培養過程中，培養工藝不同會導致病毒產量或質量的不同，目前對于細胞培養的工藝主要分為貼壁工藝及懸浮工藝。貼壁工藝是目前市場上主流的生產工藝，主要有細胞工廠、固定床、微載體工藝等。而懸浮工藝主要受限于細胞系和培養基，但易于放大，是較為理想的工業化生產模式。
 

胰酶作為細胞貼壁工藝中的關鍵物料之一，酶活性、有無動物源等因素均至關重要。逐典TryPLUS消化液作為體外重組表達的胰酶類似物，與傳統胰酶的消化動力學相似，但區別與傳統胰酶，具有純度高，細胞毒性低，細胞消化溫和等特點，產品無動物源性，無需胰酶抑制劑，稀釋即可進行終止，并且能夠兼容多種細胞培養體系，定能成為您細胞培養工藝中的絕佳幫手！