細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)步驟及原理解析
細(xì) 胞 侵 襲 Tips
細(xì)胞侵襲簡(jiǎn)介
細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)是一種體外實(shí)驗(yàn)方法，通過(guò)構(gòu)建人工基底膜，模擬體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的環(huán)境，觀察細(xì)胞在此環(huán)境中的侵襲能力。實(shí)驗(yàn)通常使用細(xì)胞小室，上室接種腫瘤細(xì)胞，下室加入趨化因子或完全培養(yǎng)基，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞穿越基底膜進(jìn)入下室的數(shù)量來(lái)反映細(xì)胞的侵襲能力。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
通過(guò)細(xì)胞侵襲對(duì)比實(shí)驗(yàn)，研究耐思基質(zhì)膠和進(jìn)口品牌基質(zhì)膠在侵襲過(guò)程中侵襲能力的對(duì)比，以及耐思胎牛血清和進(jìn)口胎牛血清在在該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的效果差異，為腫瘤細(xì)胞的侵襲機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)對(duì)比依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程
鋪膠→接種→培養(yǎng)→染色→觀察
1. 按照說(shuō)明書(shū)，用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋基質(zhì)膠，加入耐思細(xì)胞小室上室，鋪滿底部進(jìn)行孵育成膠。
2. 吸出上室中多余液體，使用無(wú)血清培養(yǎng)基接種細(xì)胞，下室加入完全培養(yǎng)基，放回小室時(shí)注意不要產(chǎn)生氣泡。
3. 將細(xì)胞小室板放回37℃、5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 棄去上室和下室的培養(yǎng)基，使用PBS清洗上室和下室。用棉簽輕輕擦去上室中未侵襲的細(xì)胞，加入固定劑固定30分鐘。晾干小室，加入結(jié)晶紫溶液染色30分鐘。
5. 棄去結(jié)晶紫溶液，使用PBS清洗后晾干小室。
6. 顯微鏡觀察并拍照記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)實(shí)驗(yàn)染色結(jié)果可見(jiàn)：
1. 在侵襲實(shí)驗(yàn)中，耐思基質(zhì)膠與進(jìn)口C品牌基質(zhì)膠效果無(wú)明顯差異；
2. 在侵襲實(shí)驗(yàn)中，胎牛血清作為影響因子，耐思南美胎牛血清效果雖略低于進(jìn)口G品牌胎牛血清，但優(yōu)于某品牌進(jìn)口血源的胎牛血清；
3. 綜合顯示，在細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)中，耐思的細(xì)胞小室、耐思胎牛血清、耐思基質(zhì)膠等耗材，可以支持完整的侵襲實(shí)驗(yàn)流程，提供完善的耗材支持。
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