目前隨著生物醫學研究的深入,多肽藥物開發已拓展到多種適應癥領域,包括糖尿病、腫瘤、抗感染、減肥、疫苗、診斷等。從業者或手動合成多肽,或采用用多肽合成儀進行半自動/全自動的合成;而多肽純化通常采用制備色譜純化收集。
多肽通常需要單獨的機器進行合成或純化,導致通量低、操作復雜。為了高效的多肽藥物研發,開發人員尋求簡化、可靠的解決方案。有沒有可能在一臺儀器上同時實現多肽合成與多肽純化的功能呢?
答案是肯定的
隨小編一起了解下Protein Technologies,Inc.(PTI)公司的解決方案:
美國多肽合成儀研發與制造商Protein Technologies,Inc.(PTI)公司【即Gyros Protein Technologies公司】生產多款全自動多肽合成儀,包括PurePep®Chorus(2,4,6通道),Symphony®X(24通道),PurePep®Sonata+(單通道工業級)。PurePep®Chorus與Symphony®X均支持多通道平行多肽合成,可滿足科研客戶及醫藥研發企業的實驗需求。
近年來PTI公司又推出了PurePep EasyClean (PEC)多肽純化技術,進一步打破了多肽生產的壁壘。開發者設計了一種基于新型無痕可裂解連接分子(PEC-Linkers)和活性過濾材料的捕獲-釋放方法,用于合成多肽的純化和修飾。PTI公司生產這些創新的PEC-Linkers,并為您提供第一個廣泛適用的肽純化試劑盒以及相關耗材,方便您迅速的將該技術應用于多肽化學實際工作中。
通過捕獲和釋放的方法進行PEC純化的方案包括下圖所示的六個步驟
1
Linker偶聯目標肽:在固相肽合成(SPPS)結束時,將PEC-Linker偶聯到目標肽上。(每個氨基酸偶聯循環作封端反應。)
2
切割肽:使用TFA混合溶液從SPPS樹脂上切割肽
3
沉淀并溶解肽
4
捕獲Linker:通過共價捕獲(“Catch”)將肽鏈偶聯在活化的過濾材料上
5
洗脫非目標肽:漂洗,共價捕獲允許洗出未結合的物質,例如截斷的序列、副產物等,并且您能夠選擇性地修飾結合的未受保護的肽。
6
a) Linker還原:PEC-Linker的還原使系統致敏,以保障安全釋放多肽;
b)酸敏感化釋放:通過弱酸性試劑洗脫(“Release”)目標肽
PurePep EasyClean (PEC)多肽純化技術詳細介紹,請參考無需HPLC,一種實現多肽高效純化的新方法
PurePep® EasyClean Auto Kit
PTI公司推出的PurePep® EasyClean Auto Kit,可在多肽合成儀上使用,進行多肽純化。PurePep EasyClean自動化試劑盒是您的終極解決方案,可實現自動化平行純化多肽。該套件包含PEC-Linker,預先填充活化過濾材料的墨盒,以及所需耗材,量身定制,以適應您現有的PurePep®Chorus多肽合成儀或Symphony®X多肽合成儀。
試劑盒組成
品類 |
內容 |
PEC-Linker |
RC+ |
活性過濾材料 |
6個墨盒(Agarose100填充) |
耗材 |
6個45mL反應器 1個SingleShot玻璃管 |
還原劑 |
DL -二硫蘇糖醇 |
封閉劑 |
L -半胱氨酸 |
緩沖液 |
緩沖檸檬酸-碳酸鈉的混合物 |
主要特點
3個手動步驟(儀器設置;加入多肽產物并運行;收集多肽與乙醚沉淀)
與色譜法相比,每次肽純化的手動操作時間減少90%
6條或更多的自動多肽純化所需時間不到6小時
與傳統色譜相比,毒性溶劑使用減少85%
該試劑盒適用于在PurePep®Chorus或Symphony®X多肽合成儀上平行純化6 x 100 μmol(Synthesis scale)多肽。
PurePep®Chorus多肽合成儀結合了穩定自動化的多肽合成、多肽切割及多肽純化;可先平行合成6條不同肽序,并原位切肽,然后在同一臺儀器上,平行純化6條多肽;使用感應加熱能快速合成多肽,同時正交捕獲-釋放PurePep EasyClean (PEC)技術可實現高效多肽純化;可有效應用于疏水肽(hydrophobic peptides)及聚集肽(aggregating peptides)的合成與純化。