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原代細胞、細胞株與細胞系概述和選擇方法

瀏覽次數:680 發布日期:2023-7-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內需掌握好細胞的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的一致性。

原代細胞生長緩慢,一般認為,原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。

原代細胞是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。

細胞株(cell strain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養細胞中獲得具有特殊性質或標志物的細胞稱為細胞株。一般認為,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。

細胞系(cell line)是原代細胞經傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續傳代的細胞叫做連續細胞系或無限細胞系,不能連續培養的稱為有限細胞系。大多數二倍體細胞為有限細胞系。由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限, 可稱為有限細胞系(finite cell line), 如可以連續培養, 則稱為連續細胞系(continuous cell line), 培養50代以上并無限培養下去。人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。

原代細胞與細胞系該如何選?

原代細胞生長緩慢,一般認為,原代細胞培養的第1代和傳代到第10代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細胞叫做細胞株。當細胞傳至50代以后又會出現“危機”,這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點,從而可能無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系。

細胞系因其容易培養、種類多、產量可觀的優點一直是細胞水平研究的Shou選,且價格相對低廉,但細胞系“價廉卻不一定物美”。研究發現,細胞系在連續培養的過程會不斷發生突變,長時間的多次傳代可能會導致細胞系的基因型和表型都發生變化,從而影響實驗結果。例如有研究報道,HEK293經腺病毒轉染后得到的細胞更接近未成熟神經元細胞;MDA-435作為乳腺癌細胞被廣泛用于各種研究,但近年來越來越多證據表明其可能為一種黑色素瘤細胞。

原代細胞則不存在這些問題,雖然原代細胞分離和培養的成本可能相對更高,但原代細胞作為更接近體內環境的研究模型,可讓你的研究結論更加接近“事實”,且原代細胞的使用可減少動物實驗所需的成本開支。另外在某些人體體內無法進行的實驗,原代細胞因其高度保持了在體內的生物學特性,可在一定程度解決這個問題。

由于永生化的細胞系與體內組織細胞的生物特性相差甚遠,導致許多生理和病理的過程難以重復,近年來,原代細胞正逐步成為細胞和分子生物學研究的Shou選工具,為疾病機制、藥物研發等提供了高質量的模型。但不可能否認的是,細胞系在科研中的地位仍十分重要,例如在標準化方案的確立上細胞系是良好的工具,某些需要大量細胞的研究如全基因組遺傳篩選,由于原代細胞數量有限且對培養條件要求苛刻,細胞系也是第1選擇。
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