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熒光曲線:免疫熒光中樣本反應時間對熒光曲線和結果的影響

瀏覽次數:1552 發布日期:2023-5-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

免疫熒光中樣本反應時間對熒光曲線和結果的影響
 

我們本次試驗選取抗原類項目(貓瘟)、炎癥類項目(CRP)在不同展板時間時檢測的熒光曲線和結果,并對檢測的熒光曲線和結果進行分析,進而判斷反應時間對熒光曲線和結果的影響。
 

試驗一:

取來自同一只貓(貓瘟陽性)的三個糞便樣本,糞便量依次從少到多,加入稀釋液中,進行十次顛倒混勻后,靜置3min,靜置完成后,滴加4滴稀釋后的樣本液于加樣孔中,同時加入陰性對照組(加同等量的稀釋液),本次試驗采用外部展板(快速檢測)模式,分別取1-10分鐘的熒光曲線和檢測結果,觀察展板時間對熒光曲線和結果的影響。


從試驗結果可以看出,在展板未充分時,對于熒光曲線圖和結果會產生很大影響,可能會造成陰陽性的誤判,當展板充分后,檢測結果的重復性非常好,所以我們推薦使用內部展板模式進行檢測。
若檢測標本為糞便或肛拭子,若加入的樣本量過多,會導致滴加樣本時的雜質過多,造成展板時間過長或展板不充分的問題,會報錯“無效檢測卡”或出現異常曲線。因此我們取適量糞便或肛拭子樣本后,應再混勻后進行靜置,取上清液進行檢測。


試驗二:

取來自一只CRP檢測陽性犬的血液樣本,將血液樣本顛倒混勻后,用一次性定量管取10uL血液,毛細管伸入稀釋液面以下,輕捏吸氣氣囊,來回清洗毛細管2-3次,清洗完成后,顛倒混勻樣本,取100uL樣本液于加樣孔中,同時加入陰性對照組(加100uL的稀釋液),本次試驗采用外部展板(快速檢測)模式,分別取1-3分鐘的熒光曲線和檢測結果,觀察展板時間對熒光曲線和結果的影響。


從試驗結果可以看出,對于抗體或炎癥類的檢測項目,在展板不充分時,也會對結果造成很大影響,從而影響我們對疾病的診斷。
從本次試驗我們不難看出,我們的熒光檢測結果,不僅與動物本身的疾病狀況有關,也與我們檢測時加樣量的多少(糞便量過多導致展板異常)、展板時間(展板時間不足影響檢測結果)有密切關系。推薦大家選擇內部展板模式進行免疫熒光檢測。

 

發布者:江蘇語芯網絡科技有限公司
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