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核磁共振(NMR)在對死后代謝物變化分析中的應用

瀏覽次數:1605 發布日期:2023-2-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
 
法醫學對法庭的重要性不言而喻——所提供的科學證據對定罪或者無罪審判而言,至關重要。可提供的證據包括指紋識別、DNA分析、血濺形態分析(BPA)、死亡時間以及死后間隔時間(PMI)。
 
利用核磁共振(NMR)對死后代謝物變化進行分析,可提供準確可靠的死亡時間信息。
法醫學對法庭的重要性不言而喻——所提供的科學證據對定罪或者無罪審判而言,至關重要?商峁┑淖C據包括指紋識別、DNA分析、血濺形態分析(BPA)、死亡時間以及死后間隔時間(PMI)。
 
PMI間隔在上述證據中最為常用,因此它被認為是最重要的數據。確定PMI的方法有如下幾種:根據尸體的物理變化(包括體溫、肌肉僵硬程度及尸斑);DNA降解;法醫昆蟲學;以及碳定年法。在死后的幾個小時內,可通過分析尸體的物理變化來得到準確的PMI計算結果。針對死后幾周到幾年的情況,則其他方法更為精確。對于死后幾小時到幾周這段時間,目前還尚未存在任何一種方法,可提供準確可靠的PMI數據。
 
代謝組學在PMI推斷方面,具有無限潛力
 
目前,代謝組學展示出了無限的潛力,可在死后幾小時到幾周這段時間,對PMI進行推斷。該技術可分析生物體內系統的全部成分,可對死后體液中的代謝物變化進行監測。理想情況下,這些代謝物變化應隨著死后相對較長的時間,線性出現。這樣的話便可獲得準確可靠的數據。因此,目前這項研究正著手于,在那些與上述條件高度契合的體液中尋找最具潛力的代謝物。
 
許多初步研究已經在一系列的體液中,確定了代謝變化,但最近在動物模型上開展的工作,表明了眼液——即房水(AH)和玻璃體液(VH),是最適用于PMI推斷的體液。與其他諸如血液之類的體液相比,從解刨學角度上看,眼液是單獨隔離開的。因此其代謝物變化較慢,這使得測量更為可靠。
 
最近,一些來自俄羅斯國際斷層掃描中心和新西伯利亞法醫臨床局的研究人員開展了一項研究,用于確定眼液在人體PMI推斷中,是否也同樣具有前景。并且他們還測定了最具潛力的代謝物,作為該類分析的生物標志物。
 
通過使用布魯克Avance III 核磁共振波譜儀,來識別代謝物生物標志物
 
該團隊從那些具有不同PMI間隔的人類尸體上收集了血液、AH和VH,并對這些樣品進行了處理,然后得到了血漿、AH中的去蛋白提取物以及VH中的去脂質提取物。利用布魯克Biospin Avance III HD 700 MHz NMR波譜儀,可通過核磁共振(NMR)技術對這些樣品進行代謝組學定性分析。
 
根據所得數據,研究人員在三個樣品中發現了42種代謝物。在這組樣品中,有6種代謝物與所有體液中的PMI都展示出了高度線性正相關性。它們是次黃嘌呤、膽堿、肌酸、甜菜堿、谷氨酸和甘氨酸。
 
血液中的代謝物濃度變化較為雜亂無章,而與血液相比,AH和VH中的濃度變化則更慢且更為平穩。這些數據有力地支持了之前在動物中進行的代謝組學分析,因此可得到如下結論:AH和VH更適用于PMI推斷。
 
在這兩種眼液中,研究人員在VH中觀察到了最強的PMI與代謝物濃度的線性正相關關系。這種現象的原因歸結于VH具有較高的黏度,并相較于AH,其與血管系統的隔離程度較高。然而,AH取樣過程具有更低的血液污染風險——這可避免實驗中產生錯誤。并且由于AH含有非常低的蛋白質和脂質,因此其樣品制備更為簡單。
 
結合多種生物標記物進行分析,可提高PMI推斷的準確性
到目前為止,該領域絕大部分的科研文章都專注于使用一種代謝物來作為PMI推斷的生物標志物。然而,這項研究確定了6種潛在的、可用作PMI生物標志物的代謝物。因此,研究人員還進行了基于多種代謝物的代謝組學分析。
 
AH中的肌酸、膽堿和甜菜堿,以及VH中的肌酸和甜菜堿——這些代謝物呈現出了與PMI的最強正相關性。利用2-3種這樣的生物標志物組合,可顯著降低PMI推斷的誤差。有趣的是,使用三個以上這樣的代謝物并不能進一步提高PMI推斷的準確性。
 
總結
這項研究為動物數據提供了支持,表明了與血漿相比,那些解剖學上被隔離的液體更適用于PMI推斷,因為其代謝變化較慢且較平穩。AH和VH都能提供準確可靠的信息。雖然VH數據更為準確,但AH樣品更容易制備,受污染風險更小。
由于這幾種代謝物(次黃嘌呤、膽堿、肌酸、甜菜堿、谷氨酸和甘氨酸)——它們與PMI都呈線性正相關關系,因此文章作者建議,可在分析中結合使用這幾種生物標志物,以提高PMI推斷的準確性、可靠性及最大程度地減少誤差。
 
一套應用于法醫學的、全面的解決方案組合
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參考文獻:
1.    Zelentsova, E., A., et al. (2020). Post-Mortem Changes in Metabolomic Profiles of Human Serum, Aqueous Humor and Vitreous Humor. Metabolomics. https://doi.org/10.1007/s11306-020-01700-3.
 
發布者:布魯克(北京)科技有限公司
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