外泌體制備過程主要關鍵步驟及常用實驗室設備
外泌體是蛋白質、脂質和核酸的天然載體，在細胞間通訊中起著至關重要的作用。外泌體包含各種膜蛋白，例如內體相關蛋白（Alix、Tsg101 和 Rab 蛋白）、四跨膜蛋白（CD63、CD81、CD82、CD53 和 CD37）和脂筏相關蛋白（糖基磷脂酰肌醇和 flotillin）。隨著近年來生物技術、實驗室設備的不斷發展，外泌體有著廣泛的應用前景，包括藥物發現、配體篩選和靶向藥物遞送。
進而即用型、高質量的功能性外泌體的需求也越來越顯明，這種工業外泌體生產需要通過大規模外泌體制備和純化來實現。
外泌體制備過程主要分為以下幾個關鍵步驟：
1.上游生產 —— 用于外泌體制造的細胞系的培養和擴增。選擇特定的細胞系它進行細胞的傳代培養和培養擴增才能產生大量用于外泌體生產的細胞。通常，規模化擴培，可以使用生物反應器進行分批補料培養，細胞培養時采用無血清培養基可用于減少污染并有助于外泌體純化。
2.外泌體分離和純化——當前外泌體的分離方法主要包括：差速離心法、TFF切向流過濾法、密度梯度離心、空間排阻色譜法(SEC)、聚合物沉淀和免疫親和等方法。為了提高外泌體的濃度和質量，超速離心、微濾法、空間排阻色譜 (SEC)法 和免疫親和等技術多用于外泌體純化。
3.外泌體分析——為了清楚了解您的外泌體質量、大小、形態、特點還需要對外泌體進行進一步分析研究，在外泌體表征一般會使用流式細胞(FACS)多色分析、凝膠電泳western blot（WB）、ELISA等標記分析和組織學分析。外泌體質量大小、形態分析主要使用的實驗設備包括、納米粒度儀、透射電子顯微鏡 (TEM)、納米粒子跟蹤分析儀 (NTA)等。
4.凍干外泌體—— 雖然實驗室中常規的外泌體存儲條件為4℃、-20℃、-80℃。 但外泌體存儲在-80°C將不利于其運輸及應用，而采用外泌體凍干技術不僅可以在室溫條件下穩定保存還可以改善藥物遞送載體脂質體的長期穩定性。
外泌體制備過程中常用的實驗室設備：
傳統的外泌體產生的細胞作為靜態系統在燒瓶中培養，這限制了培養環境參數的控制和進一步提高產量。所以大規模的外泌體制備或者外泌體工業化生產常使用動態培養系統，比如：會使用搖瓶、旋轉瓶、滾瓶和生物反應器作為可選的外泌體制造設備。
由于在生物反應器中配置了穩定可靠的動態監控系統，可以實時控制 CO2、O2、pH 值等培養環境. 不僅在培養規模上有所擴展，而且細胞培養環境也得到了較大的改善。尤其是微載體生物反應器采用了提升式攪拌槳，較大程度地降低了細胞剪切力，溫控系統采用夾套和罐內雙溫度PID控制控溫精準度可達0.1°C。
蘇州阿爾法生物提供生物反應器廣泛應用于制備外泌體的細胞規模化擴培等外泌體制造的上游生產。同時提供，振蕩培養箱、高速離心機、低速離心機、電泳儀、電泳槽、紫外分光光度計、流式細胞儀、納米粒度儀等實驗室設備 廣泛應用于外泌體制備的各個階段.
進而即用型、高質量的功能性外泌體的需求也越來越顯明，這種工業外泌體生產需要通過大規模外泌體制備和純化來實現。
外泌體制備過程主要分為以下幾個關鍵步驟：
1.上游生產 —— 用于外泌體制造的細胞系的培養和擴增。選擇特定的細胞系它進行細胞的傳代培養和培養擴增才能產生大量用于外泌體生產的細胞。通常，規模化擴培，可以使用生物反應器進行分批補料培養，細胞培養時采用無血清培養基可用于減少污染并有助于外泌體純化。
2.外泌體分離和純化——當前外泌體的分離方法主要包括：差速離心法、TFF切向流過濾法、密度梯度離心、空間排阻色譜法(SEC)、聚合物沉淀和免疫親和等方法。為了提高外泌體的濃度和質量，超速離心、微濾法、空間排阻色譜 (SEC)法 和免疫親和等技術多用于外泌體純化。
3.外泌體分析——為了清楚了解您的外泌體質量、大小、形態、特點還需要對外泌體進行進一步分析研究，在外泌體表征一般會使用流式細胞(FACS)多色分析、凝膠電泳western blot（WB）、ELISA等標記分析和組織學分析。外泌體質量大小、形態分析主要使用的實驗設備包括、納米粒度儀、透射電子顯微鏡 (TEM)、納米粒子跟蹤分析儀 (NTA)等。
4.凍干外泌體—— 雖然實驗室中常規的外泌體存儲條件為4℃、-20℃、-80℃。 但外泌體存儲在-80°C將不利于其運輸及應用，而采用外泌體凍干技術不僅可以在室溫條件下穩定保存還可以改善藥物遞送載體脂質體的長期穩定性。
外泌體制備過程中常用的實驗室設備：
傳統的外泌體產生的細胞作為靜態系統在燒瓶中培養，這限制了培養環境參數的控制和進一步提高產量。所以大規模的外泌體制備或者外泌體工業化生產常使用動態培養系統，比如：會使用搖瓶、旋轉瓶、滾瓶和生物反應器作為可選的外泌體制造設備。
由于在生物反應器中配置了穩定可靠的動態監控系統，可以實時控制 CO2、O2、pH 值等培養環境. 不僅在培養規模上有所擴展，而且細胞培養環境也得到了較大的改善。尤其是微載體生物反應器采用了提升式攪拌槳，較大程度地降低了細胞剪切力，溫控系統采用夾套和罐內雙溫度PID控制控溫精準度可達0.1°C。
蘇州阿爾法生物提供生物反應器廣泛應用于制備外泌體的細胞規模化擴培等外泌體制造的上游生產。同時提供，振蕩培養箱、高速離心機、低速離心機、電泳儀、電泳槽、紫外分光光度計、流式細胞儀、納米粒度儀等實驗室設備 廣泛應用于外泌體制備的各個階段.
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