使用動(dòng)物源胰酶，我需要面對(duì)什么？

PART01

1.外源病毒趁機(jī)而入

動(dòng)物源性蛋白質(zhì)可能夾雜哺乳動(dòng)物病毒，大多數(shù)生物制藥純化工藝的純化流程都有病毒失活步驟，但有些病毒對(duì)典型的病毒滅活方案特別有抵抗力。此外，一些活病毒疫苗不能通過(guò)病毒滅活步驟。病毒污染風(fēng)險(xiǎn)依舊伴隨動(dòng)物源胰酶的使用存在。

表1.主要病毒滅活工藝和去除方法

2010年的G公司和M公司的兩種已獲批準(zhǔn)的小兒輪狀病毒疫苗被報(bào)道含有豬病毒DNA序列污染，隨后被歸因于用于制造疫苗的細(xì)胞庫(kù)中使用胰蛋白酶。由于尚不知道這種豬病毒會(huì)傳染給人類(lèi)，疫苗仍在市場(chǎng)上銷(xiāo)售。病毒的污染風(fēng)險(xiǎn)是使用動(dòng)物源原料無(wú)法避免的問(wèn)題。

PART02

朊病毒、支原體等污染也不容小覷

（1）朊病毒風(fēng)險(xiǎn)

圖1.朊蛋白同化

朊病毒蛋白質(zhì)不能輕易被移除或滅活，檢測(cè)也很困難。這種風(fēng)險(xiǎn)很難評(píng)估，對(duì)朊病毒通過(guò)生物制品傳播的擔(dān)憂(yōu)無(wú)疑是推動(dòng)生物制藥生產(chǎn)向無(wú)動(dòng)物源(AOF)試劑發(fā)展的主要因素。

（2）支原體污染

圖2.支原體結(jié)構(gòu)

使用動(dòng)物源胰蛋白酶制劑還可能帶來(lái)支原體等污染物，最常見(jiàn)的是豬支原體。其可以在胰蛋白酶溶液中存活，因此，使用豬源性胰蛋白酶有可能給培養(yǎng)的細(xì)胞帶來(lái)支原體污染。

PART03

法規(guī)與監(jiān)管雙重壓力

對(duì)于那些開(kāi)發(fā)使用動(dòng)物源性胰蛋白酶的工藝，現(xiàn)在可能還存在額外的監(jiān)管障礙：

圖3.CBER關(guān)于動(dòng)物源胰蛋白酶要求

CBER工業(yè)指南有一個(gè)關(guān)于胰蛋白酶的章節(jié)，指出應(yīng)根據(jù)胰蛋白酶是牛源還是豬源進(jìn)行額外的檢測(cè)。

圖4.歐洲藥品管理局關(guān)于動(dòng)物源胰酶的說(shuō)明

歐洲藥品管理局發(fā)布的關(guān)于在人類(lèi)生物藥品生產(chǎn)中使用豬胰蛋白酶的指南草案建議使用兩種不同的細(xì)胞系來(lái)測(cè)試可能在豬胰蛋白酶中發(fā)現(xiàn)的不定因子，需要做額外的測(cè)試。

PART04

走出困境靠什么——重組胰酶

要解決動(dòng)物來(lái)源的問(wèn)題，最有效的方法之一是采用重組技術(shù)生產(chǎn)，利用微生物生產(chǎn)重組胰酶是更為安全的替代產(chǎn)品。由于排除了動(dòng)物來(lái)源的原料，在產(chǎn)品純度、活性以及穩(wěn)定性上有了很好的提升和保證。