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微孔板的分類標(biāo)準(zhǔn)及使用常見問題解答

瀏覽次數(shù):2612 發(fā)布日期:2022-9-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

完美的實驗結(jié)果呈現(xiàn),除了選用適合的試劑、嚴(yán)格的操作和使用精密儀器外,正確選擇和使用微孔板這類的耗材,也是實驗成功的關(guān)鍵!
 

微孔板分類標(biāo)準(zhǔn),大致分為如下幾種方式:


一、按照顏色分類:
①黑色微孔板---用于熒光檢測實驗。
②白色微孔板---用于發(fā)光檢測實驗,有時也用于增強熒光信號強度。
③透明微孔板---用于光吸收檢測實驗。
④灰色微孔板---Alpha實驗專用板。
⑤黃色微孔板---DELFIA實驗專用板。


二、孔底分類:
①非底透---頂讀,熒光、發(fā)光等檢測實驗。
②底透---底讀,需鏡下觀察細胞形態(tài)、變化的發(fā)光實驗等。


三、按照功能分類:
①檢測板---用于實驗檢測。
②細胞培養(yǎng)板---表面細胞培養(yǎng)處理,用于細胞培養(yǎng)。
③存儲板---存儲試劑等。


四、按照材質(zhì)分類:
①聚苯乙烯(PS)---用于細胞培養(yǎng),檢測和光譜應(yīng)用等。
②聚乙烯(PP)---用于存儲。
③環(huán)烯烴(COC)---用于高分辨率聚焦顯微鏡和高內(nèi)涵篩選等。


五、按照通量(孔數(shù)量)分類:
常用板為96孔、384孔和1536孔板。


六、按照孔型設(shè)計分類:
①F-Bottom---平底,用于檢測和顯微鏡應(yīng)用等。
②U-Bottom---圓底,用于3D細胞培養(yǎng)、移液等。
③V-Bottom---用于精確移液和樣本儲存等。
④Half Area和Shallow well---用于低工作體積的實驗檢測,如HTRF和Alpha實驗等。


七、按照涂層分類:
1、培養(yǎng)細胞的涂層
①未處理---用于普通檢測板。
②細胞培養(yǎng)處理(Tissue-culture,TC)---用于貼壁細胞培養(yǎng),增強細胞貼壁。
③賴氨酸包被(Poly-D-lysine,PDL)---用于細胞貼壁能力較弱細胞培養(yǎng)。
④膠原蛋白包被(Collagen,COL)---用于增強細胞貼壁能力,角質(zhì)細胞和肝細胞培養(yǎng)。
⑤超低吸附處理(Ultra-low attachment,ULA)---用于細胞集落高含量篩選分析、3D培養(yǎng)和其他成像應(yīng)用。


2、免疫涂層
①高表面結(jié)合(High binding,HB)---用于捕獲抗原或抗體,如ELISA、DELFIA實驗。
②低表面結(jié)合(Low binding,LB)---用于生化分析,減少非特異性結(jié)合。


微孔板使用常見問題

Q1:如何選擇微孔板的顏色?
1、熒光檢測
黑色微孔板能吸收光,因此可抑制自發(fā)熒光的影響,適用于GFP、熒光素、Cy3和Cy5 等短半衰期(納秒~微秒)熒光檢測。對于使用半衰期較長(微秒~毫秒)的鑭系元素螯合物等的檢測,可使用時間分辨熒光檢測法來避免自發(fā)熒光影響,通常推薦使用白色微孔板,但如果檢測中存在較大的交叉干擾,則需要使用黑色微孔板。


2、發(fā)光檢測
通常使用光反射效率較高的白色微孔板。如需避免交叉干擾,可使用灰白色 (AlphaPlate)、灰色或黑色微孔板。此外,磷光(指微孔板等物質(zhì)受到熒光燈等光的照射后蓄存發(fā)光的現(xiàn)象)也是造成背景增強的原因之一。黑色微孔板可抑制這種現(xiàn)象帶來的影響。對于白色微孔板,在檢測前將其遮光約10分鐘以達到暗適應(yīng),即可降低磷光影響。


Q2:關(guān)于邊緣效應(yīng)的問題
關(guān)于邊緣效應(yīng)的類型與解決方案的信息如下:
①溫度梯度:可通過在測定前將微孔板的溫度預(yù)先調(diào)整為與檢測儀相同的溫度來解決。
②蒸發(fā):可使用板蓋或密封膜來防止蒸發(fā)。此外,將培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度設(shè)到100%附近也有幫助。
③針對細胞實驗中出現(xiàn)的邊緣效應(yīng),有報告稱在將微孔板放入37℃的培養(yǎng)箱前,先將微孔板置于室溫下預(yù)孵育1小時可有助于細胞均勻粘附。


Q3:1/2 AreaPlate是指什么?
相對于常見的96孔微孔板,孔徑約為其一半的微孔板。即使較少的液體體積也能保證樣品達到較高深度,避免了液體體積不足造成的信號低下。


Q4:AlphaScreen/AlphaLISA 需要使用專門的微孔板嗎?
AlphaPlate采用白色微孔板和灰色微孔板的中間色—灰白色。Alpha技術(shù)用于發(fā)射光檢測器檢測信號。發(fā)光檢測中,大多數(shù)情況使用白色微孔板,但使用AlphaPlate可抑制交叉干擾并提高檢測精度。


Q5:PerkinElmer 微孔板的特點是什么?
①采用獨有樹脂制成,可實現(xiàn)較高的光反射效率、低背景和低交叉干擾(下圖)。
②不僅擁有白色和黑色微孔板,還擁有淺孔微孔板、灰色微孔板、AlphaPlate、3D培養(yǎng)板等獨特的微孔板系列,使您可針對各應(yīng)用選擇最合適的一款產(chǎn)品。也有針對SBS標(biāo)準(zhǔn)的微孔板。適用于自動化。
③在100000級潔凈室內(nèi)制造。


發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:4008-168-068
E-mail:hezq@univ-bio.com

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