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應(yīng)用紀(jì)要:富集和脫鹽的超濾解決方案

瀏覽次數(shù):1853 發(fā)布日期:2022-7-29  來源:賽多利斯
富集和脫鹽是對(duì)生物分子進(jìn)行分析需要進(jìn)行的前處理之一。這些生物分析方法包括對(duì)純化時(shí)收集到的組分進(jìn)行組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),洗脫峰進(jìn)行SDS-PAGE電泳。以及對(duì)樣品進(jìn)行結(jié)構(gòu)和純度分析時(shí)進(jìn)行的質(zhì)譜分析、毛細(xì)管電泳、傅里葉紅外光譜分析等等。

與脫鹽柱僅能實(shí)現(xiàn)脫鹽不同,對(duì)檢測樣品進(jìn)行超濾,用超純水進(jìn)行緩沖液置換,可以快速實(shí)現(xiàn)脫鹽的同時(shí)也對(duì)樣品進(jìn)行了濃縮,同時(shí)實(shí)現(xiàn)了脫去鹽分和提高濃度的目的。如果同時(shí)檢測的樣品很多,超濾的優(yōu)勢就更加明顯了,看看這么多小兄弟齊上陣,效率杠杠的!不得不說,超濾真的是一個(gè)一舉三得的好方案。
 
讓我們一起來認(rèn)識(shí)一下超濾家族的小兄弟Vivaspin 500Vivacon 500還有哪些超能力?
 
 
樣品量低?擔(dān)心回收率

Vivaspin 500
我采用的是超快流速的PES膜,有快速能力做保障,因此我只有單面膜,非特異性吸附降低一半。
 
 

Vivacon 500
我采用的是極低吸附的Hydrosart膜,而且是膜面積非常小的橫膜,最大程度降低非特異性吸附。
 
 
效率如何進(jìn)一步提高?

Vivaspin 500
悄悄告訴你,由于我只有單面膜所以底部空間較大,離心后吸頭正好插入底部完全回收,不用反轉(zhuǎn)離心哦。
 
 
平行樣品間如何獲得
盡量一致的濃縮倍數(shù)?

Vivacon 500
我是平面膜盡量保持離心力一致即可;
 

Vivaspin 500
我是切向流單片膜,除了離心力外還要注意每一個(gè)小兄弟都保持刻度面朝上放置;如果使用的是市面上其它雙面膜的產(chǎn)品,盡量使兩個(gè)膜片側(cè)向相對(duì),而不是上下相對(duì)。
 
 
如何避免超濾管上的
保護(hù)劑干擾檢測結(jié)果?
 
我們的超濾膜上有痕量的甘油和疊氮化鈉用來避免膜干燥。通常這些保護(hù)劑不會(huì)干擾檢測。但因?yàn)楹罄m(xù)的檢測不同,如果有干擾可以用緩沖液和純凈水對(duì)超濾管進(jìn)行預(yù)潤洗。如果仍對(duì)檢測有影響,還可以用0.1N的HCl進(jìn)行預(yù)潤洗,去掉干擾峰。Vivaspin 500 有PCR grade的產(chǎn)品,進(jìn)行核酸分離時(shí)如需要避免核酸的污染,可以采用。
 
 
1劍橋大學(xué)的科學(xué)家在進(jìn)行胰島素A鏈肽段(MW 2.5kD)和降鈣素(MW 3,593 Da)研究時(shí),采用Vivaspin 500 3kD的產(chǎn)品在13000rpm 離心對(duì)它們進(jìn)行濃縮。盡管兩種蛋白的分子量很小,但回收率分別達(dá)到了98%和99%。 
 
 
 
 
我們超濾小兄弟有多種孔徑:

Vivaspin 500
(3kD,5kD,10kD,30kD,50kD,100kD,300kD,1000kD)

Vivacon 500
(2kD,10kD,30kD,50kD,125kD)

無論處理病毒、蛋白、核酸樣品均可大顯身手。
 
 
百聞不如一試,
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-參考文獻(xiàn)-
1.Alan R. Johnson, Christine Turner
Anatomy Department, University of Cambridge, Downing Street, Cambridge, CB2 3DY. UK
Lab filtration Application note 2001
發(fā)布者:德國賽多利斯集團(tuán)
聯(lián)系電話:實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品與服務(wù)事業(yè)部:400 920 9889 / 生物工藝解決方案事業(yè)部:400 680 1870
E-mail:info.cn@sartorius.com

標(biāo)簽: Vivaspin 孔徑 保護(hù)劑
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