典型的生長曲線即可分為潛伏期、指數生長期、平頂期及退化衰老四個部分，其中的三個不同生長時期（潛伏期、指數生長期和平頂期）是每個細胞系所共有的特征。通過測定生長曲線,不僅可以了解培養細胞生物學特性的基本參數、測定細胞絕對生長數、判斷細胞活力，而且也可用于測定藥物等外來因素對細胞生長的影響。本實驗采用計數法測定細胞生長曲線，通過連續對細胞計數（通常為10天，一般應每次計數3孔細胞取平均值），然后以存活細胞數對培養時間作圖，即得該種細胞的生長曲線。
 

2.實驗材料

①小鼠胚胎成纖維細胞或雞胚成纖維細胞,DMEM完全培養基。

②24孔板細胞培養板、吸管、吸球，超凈工作臺、倒置顯微鏡、細胞計數板。

①取生長狀態良好的小鼠胎兒成纖維細胞或雞胚成纖維細胞,用胰酶消化。

②用DMEM制備成細胞懸液。細胞計數后，將細胞濃度調整為(1~5)×104個/mL，精確地將細胞分別接種于兩塊24孔板中，要求每孔加入的細胞總數一致，加入的培養液量要一致。

③每天取3孔細胞消化，進行細胞計數，計算平均值。一般需連續計數10天左右。從培養起開始，每3天需給未計數的細胞換液。

④以培養時間為橫軸，細胞濃度為縱軸，將每天所得的細胞濃度標在坐標紙上，各點連線即得細胞生長曲線。

4.注意事項

① 細胞接種濃度不能過多也不能過少，在合適的濃度下細胞在7~10天內能長滿而不發生生長抑制；細胞數量太少，細胞適應期太長；數量太多，細胞將很快進入增值穩定期，在一段時間內需進行傳代，曲線不能準確反映細胞生長情況。同種細胞的生長曲線先后測定要采用同一接種密度，這樣才能做縱向比較；不同的細胞也要接種細胞數相同，才能進行比較。

② 細胞生長曲線是觀察細胞生長基本規律的重要方法。只有具備自身穩定性生長特性的細胞才適合在觀察細胞生長變化的實驗中應用。因而在細胞系細胞和非建系細胞生長特性觀察中，生長曲線的測定是最為基本的指標。

③ 細胞生長曲線雖然最為常用，但有時其反映數值不夠精確，有20% ~ 30%的誤差，需結合其他指標進行分析。在生長曲線上細胞數量增加1倍時間稱為細胞倍增時間，可以從曲線上換算出。細胞倍增的時間區間即為細胞對數生長期，細胞傳代、冷凍等實驗多應在此區間進行。

④ 細胞在不同培養液中的細胞生長曲線和細胞倍增時間可以直接反映細胞在該種培養液內的增殖速度，是對培養液進行選擇的主要依據。通過個同培養液內細胞生長曲線的差異，篩選出對成纖維細胞和上皮細胞最適合的培養液。

⑤通過對細胞生長曲線的繪制，可比較不同的培養液對細胞生長曲線變化的影響。在條件允許的情況下，分析培養液中添加不同的生物活性物質（如生長因子、激素等）對細胞生長的影響，從而篩選出合適的細胞培養液。

產 品 推 薦

【SNL-025】NIH/3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)

【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)

【SNS-002】特級胎牛血清

公 司 簡 介
 

武漢尚恩生物技術有限公司坐落于武漢東湖高新區光谷生物城，專注于細胞及系列產品的研發、生產和服務，公司建有標準化GMP實驗室、動物房，已整體通過ISO 9001:2015質量管理體系認證，獲得高新技術企業、3551人才、瞪羚企業、科技小巨人等多項榮譽。　

公司主要研發生產細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎培養基、完全培養基、輔助試劑等系列產品，提供細胞及培養配套產品一站式采購；細胞庫凍存細胞系500余種，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類；公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務等。　

公司細胞業務覆蓋國內各大高校生物實驗室、生物研究機構及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供最優質的產品和服務！尚恩生物—您專業的細胞供應商！