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在體多通道記錄技術的應用及實驗流程講解

瀏覽次數:2098 發布日期:2022-1-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
在體多通道記錄技術的應用及實驗流程
 
大腦與神經元
 

 
人類大腦由大約 100 億個神經元組成,神經元之間通過突觸相互連接成復雜的功能網絡,因而大腦是人體最復雜的器官。目前,人們對大腦的功能機制的認知還停留在較低的水平,研究大腦的功能也成為科學家的終極目標。

2013 年 1 月,人腦工程成為歐盟「未來新興旗艦技術項目」之一,未來 10 年內將獲得 10 億歐元的科研經費。隨后,奧巴馬宣布將從 2014 財年的政府預算中拿出 1 億美元,啟動"人腦活動圖"項目研究(Brain Activity Map project)。這兩大腦科學研究計劃勢必將掀起神經科學研究的熱潮。

神經元,又稱神經原或神經細胞,是構成神經系統結構和行使功能的基本單位。神經元是具有長突起的細胞,它由細胞(Soma)和細胞突起-軸突(Axon)和樹突(dendrite)構成。

神經元與神經元之間會發生頻繁的信號傳遞與交互,從而構成非常復雜的神經網絡。神經元之間的信號傳遞依賴于細胞膜上的離子通道(Ion channel)。離子通道的開閉會引起膜內外離子的交換,如 Na+/K+ 離子,從而引起膜電位的變化。

所以說神經元的信號傳遞會伴隨著電活動,當達到一定閾值時,便可引發動作電位(A c t i o n p o t e n t i a l)。檢測神經元動作電位的發生變成為研究神經活動的主要方法,比如傳統的膜片鉗技術。
在體多通道記錄技術(in-­‐vivomultichannelrecording)
傳統的膜片鉗技術是一種離體的記錄方法(in-vitro), 主要是針對離體培養的細胞和腦片進行記錄,而且大多是單通道記錄,一次只能記錄一個細胞,通量不高。隨后發展出了 MEA 技術,即 Multi-ElectrodeArray,利用多電極陣列對細胞或腦片進行記錄,這樣就變成了多通道記錄,解決了通量的問題。

然而,離體狀態下的記錄與動物的本來狀態還是相去甚遠,尤其是研究動物在某種活動狀態下的神經活動更加是不能實現。所以在體或活體狀態的多通道記錄便是迫切需要。

在體多通道記錄(in-vivo multichannel recording)是在活體狀態下研究動物神經活動的一種方法。將電極陣列植入動物的大腦某皮層或區域,電極后續接入高靈敏度的放大器及記錄系統,將記錄到的模擬信號轉換成數字信號,在配套的記錄軟件上變可以觀察到放電信號。

在體多通道記錄的實驗流程

在體多通道記錄主要包括動物手術、電極植入、信號記錄采集及數據分析等步驟。
  1. 動物手術:
 
以大小鼠為例,將實驗動物麻醉,常用戊巴比妥鈉或水合氯醛靜脈注射的方法,有條件也可使用氣體麻醉。去除動物頭頂處的毛,將動物固定在腦立體定位儀上,然后將頭皮剪開,將組織清理干凈,露出頭骨,可以比較清晰的看見骨縫。利用骨縫進行定位,確定電極植入的位置。用顱骨鉆在顱骨開天窗,一般方形的窗比較常用。小心取下骨片,再在天窗對側腦區打下幾個螺釘孔,用來固定顱骨螺釘,一般打 2 至 4 個。用 1 ml 注射器針頭小心去除硬腦膜,盡量避免出血。

(2)電極植入:

 
先固定顱骨螺釘,使得螺釘接觸到腦組織,但又不過分壓迫。用電極夾持器夾住電極,先定位在天窗上方,將電極的地線纏繞在顱骨螺釘上。講電極尖端緊挨腦組織表面。然后,用微推進器緩慢向下推進(建議使用高精度的電動微推進器),使得電極進入腦組織。注意推進的速度,使電極緩慢到達想要記錄的腦區。

(3)信號記錄:

連接好記錄系統,包括CerePlex™系列微型數字放大器,主機,電腦等。打開記錄軟件,觀察放電信號。待觀察到穩定且信噪比較高的信號,便可開始記錄。在記錄同時還可以同時接入其他外源事件和刺激,如電刺激、光刺激。

除了麻醉狀態下記錄,還可以讓動物清醒狀態下進行記錄。這樣便可結合動物行為學,讓動物完成各種任務并同時進行記錄。

(4)信號分析:
記錄好數據之后,便可進行數據分析。
 
 
康森特生物科技(長沙)有限公司代理的在體多通道神經電生理系統用于動物神經生理學實驗的多通道數據采集系統,功能強大且操作簡便。可以滿足用戶的不同實驗需求,對頭部固定或清醒自由活動動物進行高通量、低噪聲的高質量數據記錄。
 

 
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