CAR -T細胞免疫療法
 
在血液系統腫瘤治療中取得了卓越的療效，然而如何將CAR-T細胞治療應用到實體瘤治療領域仍有待進一步開發。
 
與血液瘤相比，實體瘤細胞治療遇到的一個主要挑戰是腫瘤微環境，包括：
 

• 某些趨化因子（如CCL2）硝化，抑制T細胞向腫瘤組織募集，從而被阻隔在腫瘤基質中。
• 腫瘤血管系統優先招募其他類型的免疫細胞，而非殺傷腫瘤的T細胞或NK細胞。
• 腫瘤低氧環境或某些細胞因子（如IFNβ）的產生導致免疫檢查點分子或配體的表達上調。
• 腫瘤微環境中的一些代謝產物異常，影響T細胞或Treg細胞功能。
• 腫瘤相關巨噬細胞（TAM）抑制T細胞功能。
• 腫瘤相關成纖維細胞（CAF）通過ECM阻隔T細胞，使之無法進入腫瘤內。

    腫瘤微環境導致的免疫抑制機制
 (Science. 2015 Apr 3;348(6230):74-80.)

在細胞治療的臨床前開發中，利用高通量活細胞成像技術，借助于體外3D腫瘤球模型有助于幫助我們在動物模型體內評估前，了解這些基因修飾的免疫細胞（包括CAR-T、TCR-T或NK細胞）的體外殺傷能力和安全性等，動態而直觀地監測整個殺傷過程，這對很多研究人員非常重要。

   
來自挪威奧斯陸大學國家醫院（Oslo University Hospital）轉化研究中心細胞治療部門的Else Marit Inderberg博士（免疫監測組負責人）和Pierre Dillard博士（研究科學家），在線分享她/他們如何利用高通量活細胞成像的方法來進行細胞治療的臨床前開發，尤其是在實體瘤領域，以加快細胞治療的開發進程。
   
奧斯陸大學國家醫院的細胞治療部門是歐洲最大、最現代化的學術性GMP設施之一，目前正在開展約10項臨床試驗。該轉化研究中心主要從事CAR-T和TCR-T細胞治療開發及其相關臨床試驗的免疫監測，以開發出高效的實體瘤細胞療法，如骨肉瘤和卵巢癌。
   
在此次在線分享中，Pierre Dillard博士將具體介紹如何利用Incucyte實時活細胞分析系統，基于96孔板，對不同類型的效應細胞殺傷能力進行高通量動態檢測，包括：

• 以3D腫瘤球模型為基礎，評估TCR-T、TCR-NK和CAR-T細胞的殺傷能力
• 以更為復雜的可調3D cysts結構為靶標，評估CAR-T細胞的浸潤和殺傷作用
• 檢測抗腫瘤化合物不同劑量組合對3D腫瘤球的殺傷作用，以獲得最佳的劑量搭配
• 在單細胞水平上，觀察效應細胞和靶細胞的動態相互作用，以獲得高分辨率的時間或空間維度信息

 
-相關文獻-
·      Dillard P, Kksal H, Maggadottir S M, et al. Targeting Telomerase with an HLA Class II-Restricted TCR for Cancer Immunotherapy[J]. Molecular Therapy, 2020.
·      Dillard P, Lie M, Baken E, et al. Colorectal cysts as a validating tool for CAR therapy [J]. BMC Biotechnology, 2020, 20.
·      Mensali N, Dillard P, Hebeisen M, Lorez S, Theodossiou T, Myhre MR, Fäne A, Gaudernack G, Kvalheim G, Myklebust JH, Inderberg EM, and Wälchli S. NK cells specifically TCR-dressed to kill cancer cells. [J]. Ebiomedicine, 2019.
·      Dillard, P., Köksal, H., Inderberg, E. M., Wälchli, S. A Spheroid Killing Assay by CAR T Cells. J. Vis. Exp. (142), e58785 (2018).