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戊糖片球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用步驟

瀏覽次數:290 發布日期:2021-5-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
戊糖片球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
小鼠免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒
小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒
小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
小鼠免疫球蛋白D(IgD)ELISA試劑盒
小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)ELISA試劑盒
小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
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小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒
小鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒
小鼠磷脂酶D2(PLD2)ELISA試劑盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒
小鼠磷脂肌醇3激酶(PI3-K)ELISA試劑盒
小鼠磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
發布者:上海研生實業有限公司
聯系電話:021-59963601
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