亚州综合一区_啪啪av大全导航福利_韩国一级片免费看_国产对白做受_夜夜躁很很躁日日躁2020_第一色网站

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > Countstar雙熒光AO/PI細胞計數法在含紅細胞全血樣本計數中的優勢

Countstar雙熒光AO/PI細胞計數法在含紅細胞全血樣本計數中的優勢

瀏覽次數:8322 發布日期:2021-5-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

從全血中提取細胞樣本是一個常用的實驗技術手段,因為這類樣本能模擬人體或動物的真實細胞環境。相對于下游的實驗例如藥物篩選、功能研究等會比單純的細胞系會有更好的實驗效果。


從血液中提取細胞最重要的一步就是去除紅細胞。以成年人外周血為例,其各種細胞的數量及比例如下
表所示:
 

  紅細胞 白細胞 血小板
含量
(個/L)
(4.0-5.5)×1012 (4.0-10.0)×109 (1.0-3.0)×1011
    中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞  
占比   50%-70% 20%-40% 3%-8%  

 
紅細胞數量巨多,為了下游實驗能制備好的細胞樣本必須去除紅細胞。目前常用去除紅細胞有以下幾個方法:
1.氯化銨裂解法:
它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。這種方法簡單易行且比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用于原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
但是裂解后紅細胞碎片較多,不易去除。
2.低滲裂解法
利用細胞滲透作用原理,細胞在低濃度緩沖液中會滲透吸水導致紅細胞破裂,而白細胞相對紅細胞有一定的耐受壓,可以達到分離的目的。但是低滲法也能對白細胞有一定損傷,會對后續功能實驗有影響。
3.密度梯度離心
常用的兩種介質是Ficoll和PercollTM 。Ficoll是蔗糖的多聚體,常用于外周血單個核細胞的分離。Percoll是二氧化硅膠體顆粒,可形成連續和不連續兩種梯度,主要能分離細胞,亞細胞結構和病毒的分離。密度梯度離心分離能更好的去除雜細胞獲取目的細胞,且不會損傷細胞在下游分析中的功能或性能;常用于分選及功能實驗;該方法效果好但是耗費時間長。

全血樣本經細胞提取后用于下游實驗時,精確的細胞計數是細胞實驗中至關重要的一步。因此需要對總的有核細胞和活細胞都要進行計數。雖然臺盼藍染色法是常用的活細胞計數方法,但是對于含有紅細胞、血小板和雜質的樣本,臺盼藍染色法不能區分計數有核細胞、紅細胞和雜質。如果想快速精確計數有核細胞且進行精確細胞活力分析,那么Countstar雙熒光AO/PI細胞計數法必不可少,它能保證計數結果的準確性和重復性。


 

 
Countstar細胞分析儀還能對全血樣本直接計數分析。實驗過程如下:
1)取 20µL 血液樣品并用 180µL PBS 稀釋。
2)取 12µL AO/PI 染色液加入 12µL 樣品中,用移液器輕輕混合;
3)將 20µL 混合溶液吸入細胞計數板;
4)讓細胞在計數板內靜置約 1 分鐘;
5)將計數板放入 Countstar ® FL 儀器;
6)選擇“AO/PI 活率”測定,然后輸入此樣品的樣品 ID。
7)選擇稀釋比率和細胞類型,點擊“運行”開始測試。

 

結果
1.全血的明場圖像
在全血的明場視野圖像中,有核細胞淹沒在紅細胞中不可見。圖1
          
 

 
2.全血的熒光圖像
AO 和 PI 染料都能對細胞核中的 DNA 染色。因此,血小板、紅細胞或細胞碎片的存在不會影響白細胞濃度和活率結果;罴毎ňG色)和死細胞(紅色)很容易在熒光圖像中看到(圖 2)。

 

 


3.白細胞的濃度和活率
Countstar® Rigel 軟件自動對每個樣品的三個視野進行細胞計數,并計算白細胞總數(1202)、濃度(1.83x106細胞/ ml)和活率(82.04%)的平均值。 全血圖像和數據以PDF、圖片或Excel 格式導出進行其他分析或數據歸檔。

 


在不裂紅時對全血進行有核細胞計數可計算有核細胞的回收率。采用熒光計數法對分離后的樣本能有效排除細胞碎片、紅細胞等雜質影響,從而達到精確計數目的。
發布者:上海睿鈺生物科技有限公司
聯系電話:400-820-2912
E-mail:marketing@countstar.cn

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 性欧美激情精品 | 免费看A片久久久久久久久久 | 色综合久久综合欧美综合网 | 一区二区日本视频 | 在线观看网站av | 牛牛a级毛片在线播放 | 麻豆国产传媒精品视频 | 日本成人一区 | 欧美5-7sexvideos处 | 日本亚洲精品中字幕日产2020 | 狠狠躁夜夜躁青青草原软件 | 97人人模人人爽人人喊下载播放 | 国产靠逼视频 | 大地资源影视免费观看高清 | 亚洲乱码一卡二卡四卡乱码新区 | 久久亚洲精品高潮综合色a片 | 丁香色婷婷国产精品视频 | 欧美极品在线播放 | 欧美特黄a级高清免费大片a级 | 色老板精品视频在线观看 | 男人av在线| 高潮喷水无码中文字幕 | 欧美成人高清 | 麻豆视频在线观看免费 | 91夜夜揉人人捏人人添红杏 | 2015av天堂影音先锋 | 成人cosplay福利网站18禁 | 欧美高难度牲交视频 | 青青青伊人| 免费观看黄网站在线播放 | 中文字幕一区日韩 | 黑人粗又大 | 老鲁夜夜老鲁 | freefromvideos性欧美 | 欧美老妇交乱视频 | 婷婷丁香六月天 | 日韩看人人肉肉日日揉揉 | 中国1级黄色片 | 欧美黄色录像网站 | yw免费看妹子超在线 | 96国产精品久久久久aⅴ四区 |