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白細胞介素17 il-17 檢測試劑盒操作步驟

瀏覽次數:289 發布日期:2020-7-6  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
白細胞介素17 il-17 檢測試劑盒操作步驟:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差(w1-w2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(s)和陰性對照(n)的 od值后,計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標準。
發布者:上海邦景實業有限公司銷售部
聯系電話:021-52960951
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