死亡之舞
亨廷頓舞蹈癥（Huntington’ s disease, HD），又名慢性進行性舞蹈癥，是一種緩慢起病的遺傳性神經退化疾病。
亨廷頓舞蹈癥表現為短暫不能控制的裝鬼臉、點頭、手指跳動。隨病情加重，不隨意運動惡化，出現舞蹈樣不自主運動、吞咽困難等癥狀。亨廷頓舞蹈癥通常在發(fā)病 15～20 年后死亡，對亨廷頓舞蹈病的治療目前僅限于針對癥狀的治療，沒有方法可以預防發(fā)病或減緩進展，因此國內外醫(yī)學界稱之為“死亡之舞”。
圖片來源：https://trypanophobia.wordpress.com/2012/10/30/darker-dancing/
停止死亡之舞！
亨廷頓舞蹈癥由常染色體顯性突變引起，在亨廷頓基因（HTT）的第一個外顯子中存在CAG三核苷酸的異常重復擴增，大腦中不斷聚集突變蛋白（mHTT），最終導致神經功能失調和退化。
通過基因治療，靶向抑制突變CAG重復序列，抑制mHTT表達，或可成為亨廷頓舞蹈癥治療的關鍵。
“納米級手術刀”扭轉局面
2019年6月， Nature Medicine 發(fā)文報道，通過對轉基因tgHD小鼠的研究發(fā)現，重組AAV將ZFP-TFs遞送給原代神經元，可實現突變mHTT mRNA和mHTT蛋白降低98%以上，但對正常HTT表達沒有影響。通過腦脊液中mHTT蛋白檢測發(fā)現，mHTT蛋白呈現劑量依賴性減少，一次注射就可以使mHTT在相當長一段時間內穩(wěn)定。
2020年2月，Nature Communications 在線發(fā)文，通過重組AAV將AAV-GFAP-Cre、AAV-DIO-NeuroD1和AAV-DIO-Dlx2混合注射在紋狀體中，可將紋狀體星形膠質細胞成功轉化為神經元。
近期，uniQure公司宣布其基于AAV5的候選基因療法AMT-130用于治療亨廷頓病已獲得FDA研究性新藥（IND）批準，允許開始其I/II期臨床研究。
不治之癥或將在基因治療手中，扭轉局面。
mHTT蛋白成為亨廷頓舞蹈癥研究的最佳生物標志物之一
對亨廷頓舞蹈癥患者腦脊液中疾病相關蛋白進行定量分析，有助于監(jiān)測疾病進展和評估治療干預的效果。伴隨著疾病的進展，患者腦脊液中的mHTT濃度增加；治療后mHTT蛋白濃度呈劑量性下降。mHTT蛋白成為亨廷頓舞蹈癥研究的最佳生物標志物之一。
病程最早期mHTT蛋白在腦脊液中濃度非常低，通常低至fg/ml級別，常規(guī)Elisa等蛋白檢測方法無法檢出這些蛋白。治療晚期檢測中，同樣也會出現這一問題。因此，在病程監(jiān)控和治療效果評價中，通過超高靈敏度的蛋白檢測方法實現fg/ml低豐度表達蛋白的定量顯得尤為重要。
圖：SMC™超敏技術對不同年齡tgHD小型豬腦脊液中mHTT蛋白進行檢測，年齡與mHTT水平呈正相關（Molecular Therapy，2018）
默克SMC™超敏檢測實現mHTT蛋白飛克級定量
默克SMC™ 單分子免疫檢測平臺，可實現10 μL腦脊液中mHTT蛋白fg/ml準確定量。針對mHTT-Q45(1-573)定制開發(fā)的SMC™試劑盒最低檢測下限LOD可達0.043 pg/mL （數據來自默克R&D實驗室），滿足樣本中mHTT基線的全部檢出。
圖2：SMC™獨特的檢測洗脫步驟和專利的激光單分子計數技術，有效降低背景信號值，增強檢測信號，實現飛克級蛋白定量
經驗分享：默克SMC™ mHTT超敏試劑盒開發(fā)經驗分享
試劑盒的開發(fā)往往需要不斷的嘗試與經驗積累。如何開發(fā)屬于自己的SMC™超敏試劑盒，提升自有抗體對的檢測靈敏度 ？在開發(fā)SMC™超敏試劑盒的過程中，需要注意哪些事項 ？ 默克CAST（customer assay R&D）團隊主管Sarah將與您分享相關話題。Sarah擁有30多年的Bio-pharm研發(fā)經驗和豐富的SMC™超敏試劑盒開發(fā)經驗。
Sarah將與大家分享如下話題：
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SMC™單分子免疫檢測技術實現HTT痕量檢測的原理
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如何達到mHTT 和總HTT蛋白的fg/ml級定量
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SMC™超高靈敏度試劑盒的開發(fā)與驗證
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