說(shuō)到免疫印跡最重要的就是抗體的選擇了。在免疫印跡中我們會(huì)用到一抗和二抗等抗體，本文著重給大家介紹一下一抗的選擇。
一抗就是能和特異性抗原特異性結(jié)合的蛋白。種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。抗體因其種屬來(lái)源不同可以分為多種類型，如鼠抗，兔抗，羊抗等等，那么在使用時(shí)我們應(yīng)該怎么選擇呢？
檢測(cè)任何一種目的蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為了在試驗(yàn)過(guò)程中盡快找到最適合的抗體，往往需要考慮以下幾種因素：
1.確定自己的實(shí)驗(yàn)類型。如WB、IHC、ICC、ELASA等。一般的抗體說(shuō)明書上都會(huì)給出該抗體適用于哪一種分析類型。
2. 單克隆or多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但極易出現(xiàn)非特異性條帶。
3.確定自己的實(shí)驗(yàn)樣本的結(jié)構(gòu)信息。不同的抗體是由不同的免疫原（全長(zhǎng)蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機(jī)體或細(xì)胞等）免疫宿主而制備得來(lái)，抗體說(shuō)明書一般都有免疫原的描述，如果檢測(cè)的樣本是蛋白片斷或蛋白全長(zhǎng)的某一區(qū)域，則必須選擇用含此片段結(jié)構(gòu)域的免疫原制備出的抗體。還有一點(diǎn)就是樣本的制備過(guò)程，有些抗體要求樣本經(jīng)過(guò)某些特殊處理，比如將樣本還原和變性等，還有一些抗體僅識(shí)別天然折疊狀態(tài)的蛋白。
4.抗體信息的確認(rèn)。這一點(diǎn)雖然不是技術(shù)方面的限制因素，但對(duì)于結(jié)果還是會(huì)有很大影響的。當(dāng)我們拿到抗體時(shí)，一定要仔細(xì)確定抗體的名字，別名、亞型等信息，千萬(wàn)不要因?yàn)檫@些小細(xì)節(jié)導(dǎo)致我們的實(shí)驗(yàn)毀于一旦。
當(dāng)然選擇了正確的抗體之后，要想有高質(zhì)量，滿足期刊雜志發(fā)表的圖片，還需要有高品質(zhì)的成像儀來(lái)保駕護(hù)航。美國(guó)Azure多功能分子成像系統(tǒng)，全新升級(jí)，為您的實(shí)驗(yàn)護(hù)航。