人體外周血淋巴細胞培養搭配染色體核型分析技術是診斷染色體變異的重要手段。淋巴細胞的培養是染色體標本制備的關鍵。培養基的選擇、秋水仙素的用量及時間、溫度、pH，固定、滴片等其中任何一點處理不當，就極有可能導致實驗失敗。本期專題，我們就聊聊 “外周血淋巴細胞培養，如何簡化操作、做好細節、提高細胞培養成功率？”

“ 一管到底 ”簡化操作，提高效率

外周血培養時間長，過程復雜，因此我們建議采用 “一管到底” 的方法，用離心管代替培養瓶，省去了敲除培養瓶蓋的步驟，也無需轉移細胞懸液，杜絕了常規法中潛在的交叉風險，簡化操作流程，提高了效率。

外周血培養，還要注意這些

1.  接種的血樣愈新鮮愈好，最好是在采血后24小時內進行培養，若不能立刻培養，應置于4℃存放，避免保存時間過久影響細胞活力。

2. 秋水仙素是使細胞停止在中期的關鍵，因此使用秋水仙素的質量很重要，勿使用來源不明的廠商產品。

3. 使用的低滲液、固定液需要現用現配，避免低滲作用，細胞固定效果不佳，無法收獲完美染色體。

4. 收獲細胞時，吸取上清液時動作要輕， 臨近底部要注意吸取的動作，否則易把培養的細胞吸出。每次吸取上清液都要在管的底部留上大約1mL的上清 , 以確保培養細胞的數量 。當最后一次加入固定液后， 要用力充分混勻 ，防止細胞粘連在一起而影響下面步驟的順利進行 。

5. 滴片是染色體制備中影響染色體形態的關鍵一步，首先是滴片用的玻片要非常干凈，冰凍4h以上，即為冰片，滴片時現用現拿，如果冷凍不夠，細胞難以貼附在玻片上，會影響染色體的分散和分帶效果。滴片時也要注意保持滴管與玻片距離，一般控制在20 ～30cm ,而且滴的順序要呈S型，讓其盡可能滴勻 。然后用嘴或吸耳球輕輕混勻，最后在酒精燈上快速劃過幾次，確保細胞確實固定好。

6. 此外，培養基的保存很關鍵，若不是馬上使用，需放入0℃下保存，防止藥品失活。

BI外周血淋巴細胞培養基

BI在 ”一管到底“ 方法的基礎上，采用帶有頂膠塞的試管，加樣無需開蓋，細胞培養和染色體制備在同一管中進行，操作方便，避免污染。

HEPES緩沖體系適用于封閉式細胞培養。

為確保培養基質量，采用高品質胎牛血清
 

紅框標記處為BI外周血培養制備的完美核型

產品信息：

參考文獻：

曹海濤 . 染色體外周血淋巴細胞培養中的幾點體會  現代中西醫結合雜志

侯艷香 . 人外周血淋巴細胞培養 染色體制備及影響因素  檢驗醫學與臨床 2013，4，10（7）

趙小平， 陳紹坤， 黃燕， 稅青林 . 外周血淋巴細胞培養及染色體制備過程中的問題分析 現代預防醫學 2009 ， 36 （11 ）
 

關注微信公眾號
了解更多細胞培養知識

BI中國市場部：上海逍鵬生物科技有限公司
產品咨詢：021-58785545-8006, 18917190011
技術支持：400-820-3979

詳情點擊：閱讀原文