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深受科學家的熱愛斑馬魚基因編輯技術介紹

瀏覽次數:7855 發布日期:2019-8-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
斑馬魚又叫藍條魚,因為其體表有暗藍色和銀色的類似于斑馬一樣的條紋而命名。斑馬魚屬于鯉科魚類,同屬鯉科的還有我們十分熟悉的鯉魚、鯽魚等。斑馬魚的體型較小,成魚體長約4-6厘米,而且成魚常年產卵且產卵量大,可達300-1000粒,還是體外受精并發育,因此十分適合進行實驗室的大規模養殖與篩選。
  
斑馬魚這種原產于印度、孟加拉的淡水魚還是直到二十世紀七八十年代時才被發現并廣泛用于實驗室研究。當然,這還是美國著名遺傳學家George Streisinger的功勞。1994年在冷泉港召開的研究專題會議正式確立了斑馬魚的模式生物地位。不久后的2001年,英國桑格研究院正式立項開始斑馬魚全基因組的測序工作,不久之后其基因組草圖完成,但其質量仍暫時無法與人類和小鼠基因組相比。隨著參考基因組協會的加入,這一項目的主持單位也在定期更新著斑馬魚基因組的拼裝,目前的參考序列版本為2013年發布的GRCz10。
 
斑馬魚與人類的基因相似度高達87%,可以利用其進行廣泛的發育生物學和分子發育遺傳學的研究,這就是斑馬魚(Danio rerio)。作為一種新型的脊椎模式動物,正是因為它的突出貢獻,得了一個小別名:「水中小白鼠」。
 
在運用CRISPR/Cas9技術研究的魚類中,斑馬魚 (Danie rerio)是被研究得最多的對象。
 
上海海洋大學水產與生命學院利用CRISPR/Cas9敲除斑馬魚細胞周期蛋白M2(CNNM2)基因,獲得了能穩定遺傳的CNNM2基因敲除斑馬魚個體,為進一步研究CNNM2基因和機體鎂離子穩態之間的關系打下了基礎 (黃振玉等, 2015)。

敲5除斑馬魚kctd1基因0,發現kctd10突變個體的房室管畸形,產生一個拉長的線狀的心臟 (張緒帥, 2016)。

重慶醫科大學基礎醫學院運用CRISPR/Cas9技術敲除斑馬魚faf1基因,得到雜合突變型斑馬魚,并觀察到該雜合突變型個體有體細胞色素沉積延遲,受精后第4天開始尾部肌節出現“結節樣”表型以及頭顱縮小、舌骨小角角度增大等顱面軟骨畸形的變化,并于受精后8~9 d 死亡(劉菁等, 2017)。

湖南師范大學利用CRISPR/Cas9系統成功敲除斑馬魚fhl1a基因,并證明fhl1a基因突變能穩定地遺傳到下一代個體,為進一步研究fhl1a基因在心臟發育中的具體調控機制打下基礎 (陳思行等, 2017)。

首都醫科大學附屬北京同仁醫院內分泌科成功構建了rfx6基因敲除斑馬魚動物模型,初步研究發現rfx6純合突變體生長發育遲滯、體型瘦小、呈現糖尿病消瘦體型并且不能產生后代,得出結論:rfx6在斑馬魚胰腺的發育中占據重要地位,是控制斑馬魚胰腺發育的關鍵因子 (程呈等, 2015)。
同濟大學生命科學與技術學院利用CRISPR/Cas9構建了穩定遺傳的斑馬魚WHSC1L1純合突變體,為研究胚胎發育過程中由此基因突變引起的組蛋白甲基化修飾變化對胚胎發育的影響及機制提供了有力的幫助 (陳韻如, 2016)。

作為優選的模式脊椎動物,斑馬魚模型可以用來評價人類基因的作用與功能、解析其在遺傳與發育上發揮作用的分子機制。通過基因組改造(基因敲除、敲入和轉基因等)構建人類疾病的斑馬魚模型,表型模擬人類疾病的病癥,進而用于研究分子遺傳病的病理機制、篩選治療疾病的化學藥、開發基因治療的生物藥等生物醫藥的研發。


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