第一步是確立解決實(shí)驗(yàn)問題的技術(shù)，例如激活，抑制或調(diào)控靶標(biāo)、闡明MOA（作用機(jī)制）、確定受體 - 配體或蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)的相互作用、鑒定和定量疾病特異性生物標(biāo)志物或血漿中的生物標(biāo)志物成分。

 

 

生物標(biāo)志物測定旨在檢測或定量生物學(xué)中的靶標(biāo)樣本(例如，復(fù)雜基質(zhì)）中的含量，這種負(fù)責(zé)基質(zhì)涵蓋范圍有：細(xì)胞培養(yǎng)中的分泌蛋白，細(xì)胞裂解液，組織提取物，唾液，尿液，血清，血漿，血液的上清液，或其他液體（例如，CSF，BALF）。分析技術(shù)可能并非總是如此。某些實(shí)驗(yàn)方法在某些基質(zhì)中存在干擾而不適用。例如，在血清，血漿或血液中的血紅蛋白表現(xiàn)出廣泛的可見光譜吸光度，即在350和600nm之間。檢測方法中，依賴于這些波長的激發(fā)或發(fā)射將容易發(fā)生干擾。基于洗滌的檢測方法可以避免由于過多復(fù)雜基質(zhì)引起的干擾，因?yàn)楦蓴_物質(zhì)在洗滌過程中被沖走。為了確定基質(zhì)的相容性，在合適的稀釋液中的加標(biāo)回收和標(biāo)準(zhǔn)曲線是傳統(tǒng)的驗(yàn)證方法。

 

 

 

一個(gè)實(shí)驗(yàn)的靈敏度決定了其在動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)的對其靶點(diǎn)的檢測的“分辨率”，同時(shí)預(yù)警了不同批次批次之間的最低檢測范圍的差異性。靈敏度同時(shí)也依賴于檢測樣本。血清中的檢測難度高于細(xì)胞水平。同時(shí)“珍貴樣品”如有限的細(xì)胞或者組織會(huì)決定測試的容許體積等。方法技術(shù)也會(huì)影響檢測靈敏度，如發(fā)光和熒光的模式比吸收光的模式的靈敏度要好。

 

動(dòng)態(tài)范圍定義了檢測下限和上限。例如下圖所示，不同的檢測技術(shù)對于腫瘤壞死因子TNF的檢測動(dòng)態(tài)范圍達(dá)到了數(shù)量級(jí)的差異。因此，當(dāng)樣品含量超過了其實(shí)驗(yàn)方法的動(dòng)態(tài)范圍，其濃度，動(dòng)力學(xué)參數(shù)，活性，結(jié)合力將不準(zhǔn)確。因此，需要預(yù)先滴定檢測窗口以免達(dá)到飽和。

 

 

 

 

 

特異性對于確保篩選靶向的靶點(diǎn)或表型非常重要。對于免疫分析，需要考慮針對靶向分析物特異性的抗體，特別是對于靶向蛋白質(zhì)的部分修飾新表位變化,結(jié)合/未結(jié)合或活性/非活性狀態(tài)。此外，還需要考慮物種和靶點(diǎn)的交叉反應(yīng)性。

 

 

盡管信號(hào)強(qiáng)度和和性噪比（S/B）通常被用來評估一個(gè)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量，可重復(fù)性和準(zhǔn)確性也是非常重要的。Z’是一個(gè)非常好的評判標(biāo)準(zhǔn)。例如，相對而言，高Z’而低信噪比的實(shí)驗(yàn)方法好于低Z’高性噪比的實(shí)驗(yàn)方法。與此同時(shí)，實(shí)驗(yàn)發(fā)法應(yīng)當(dāng)具有高重復(fù)性，定量實(shí)驗(yàn)應(yīng)該有標(biāo)準(zhǔn)品做參照。設(shè)置好對照，好的標(biāo)品，抗體，陽性化合物對于建立可靠的實(shí)驗(yàn)是非常重要的。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

我們珀金埃爾默能夠提供多種實(shí)驗(yàn)方法開發(fā)的解決方案。例如，我們擁有的均相的Alpha技術(shù)以及TRFRET技術(shù)，時(shí)間分辨defia技術(shù)，化學(xué)發(fā)光技術(shù)，細(xì)胞增殖和毒性試劑盒，各類GPCR以及動(dòng)物模型的探針細(xì)胞株，微孔板等試劑耗材，能夠助力您新藥研發(fā)的各個(gè)環(huán)節(jié)。

 

 

 

 

珀金埃爾默致力于為創(chuàng)建更健康的世界而持續(xù)創(chuàng)新。我們?yōu)樵\斷、生命科學(xué)、食品及應(yīng)用市場推出獨(dú)特的解決方案，助力科學(xué)家、研究人員和臨床醫(yī)生解決最棘手的科學(xué)和醫(yī)療難題。憑借深厚的市場了解和技術(shù)專長，我們助力客戶更早地獲得更準(zhǔn)確的洞見。在全球，我們擁有12500名專業(yè)技術(shù)人員，服務(wù)于150多個(gè)國家，時(shí)刻專注于幫助客戶打造更健康的家庭，改善人類生活質(zhì)量。2018年，珀金埃爾默年?duì)I收達(dá)到約28億美元，為標(biāo)準(zhǔn)普爾500指數(shù)中的一員，紐交所上市代號(hào)1-877-PKI-NYSE。了解更多有關(guān)珀金埃爾默的信息，請?jiān)L問www.perkinelmer.com.cn。