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賽業“阿波羅計劃”CRISPR-AI敲除小鼠精子庫創新技術介紹

瀏覽次數:3329 發布日期:2017-7-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

作為全球領先的轉基因/基因敲除模式動物商業技術平臺,歷經十多年的發展,賽業已服務數千客戶,學術引用累計超過1300篇,是目前國際上最主要、最被認可的基因工程模式動物商業服務平臺之一。在基因工程模式動物領域數年不懈的耕耘,讓賽業積累了豐富的模式動物制備經驗,也獲得了無數客戶的充分認可。

為了給客戶提供更快捷更高效的服務,賽業生物一直致力于技術創新。2015年下半年,賽業生物應用最先進的高通量電轉受精卵方式替代手工注射受精卵的方式,結合賽業特殊優化的超排卵技術和人工智能(AI)的AlphaKnockout基因打靶專家方案系統,首批測試了100個CRISPR-AI基因敲除小鼠精子凍存項目,各項數據表明新技術大幅度地提高了項目的成功率。

令人驚喜的測試結果讓賽業生物決定乘勝追擊。2016年初,賽業決定啟動被譽為“賽業阿波羅計劃”的“萬例CRISPR-AI敲除小鼠精子庫”項目。得益于過往數年經驗的累積以及賽業成熟的高通量載體構建平臺與電轉受精卵技術,賽業生物在短短一年半內已經建立了3800余個CRISPR-AI敲除小鼠精子品系。預期2018年會完成10000個CRISPR-AI敲除小鼠精子品系,并且基因敲除大鼠的精子庫籌建已經列入日程。

未來依托“萬例CRISPR-AI敲除小鼠精子庫”,賽業不再局限于提供基因敲除小鼠定制服務,而是將業務板塊拓展為為科研機構及醫藥產業提供完整的人類疾病模型保種、生產、供應和信息咨詢等服務,以便在更廣范圍、更大程度、更高層次上推動我國基因工程模式動物研究的發展。

 

創新技術介紹:

1、天河二號助力AlphaKnockout基因打靶專家系統

賽業生物開發的AlphaKnockout基因打靶專家系統實現了智能化的基因敲除小鼠方案設計,并且在天河二號超級計算機的強大運算功能支持下,10秒即可展現設計方案(www.alphaknockout.com)。智能化的方案設計過程,加速了萬例CRISPR-AI敲除小鼠精子庫建設項目的進展。

2、優化的高通量電轉技術

傳統的受精卵注射技術需要借助顯微操作系統人工逐個卵進行注射,操作效率一直無法提升。賽業生物聯合專業設備研發單位,研發出一款適合哺乳動物受精卵電轉的系統和配套體系。該系統可將發育到特殊階段的小鼠受精卵特殊處理后進行大批量的受精卵轉染。電轉技術突破了注射環節的效率瓶頸,使得高通量的操作變成了可能,從而大幅提高了制備的效率。

3、超高效的受精卵獲得技術

研究表明聯合使用抑制素抗血清(IAS)和常規超排激素(PMSG和HCG)可以大幅提高小鼠的超排卵數量。賽業生物聯合知名生物試劑公司共同進行促排卵試劑的研發,經過一系列優化,最終使得供卵小鼠的供卵數量提高了2-3倍,大幅減少了小鼠的使用,增加了動物福利,也加速了CRISPR-AI敲除精子庫小鼠復蘇的過程。

4、全新的凍存技術體系

賽業生物在原有的無血清非程序凍存專利技術的基礎上,針對動物的精子和胚胎的凍存技術進行大量的體系優化,使得復蘇率和出生率進一步得到了提升,并且具有非常理想的穩定性。這為我們CRISPR-AI敲除小鼠庫的構建提供了穩定的凍存技術支持。

賽業生物成立十一年來,一直致力于技術創新。我們不僅努力提高基因工程模型小鼠的制備效率,而且從動物福利的角度出發,積極探索和研究減少使用動物的方法。此外,賽業生物也積極嘗試利用人工智能技術和生物信息學技術推動生物技術領域的人工智能化進程。以上種種努力,讓賽業生物穩步成為全球領先的轉基因/基因敲除模式動物商業技術平臺,成為國際上最主要、最被認可的基因工程模式動物商業服務平臺之一。

 

參考文獻:

1. T.Takeo and N.Nakagata, Superovulation Using the Combined Administration of Inhibin Antiserum and Equine Chorionic Gonadotropin Increases the Number of Ovulated Oocytes in C57BL/6 Female Mice. PLOS ONE on May 29,2015,10 (5)

2. Sean Chen, Benjamin Lee, Angus Yiu-Fai Lee, Andrew J. Modzelewski, Lin He. Highly Efficient Mouse Genome Editing by CRISPR Ribonucleoprotein Electroporation of Zygotes .Journal of Biological Chemistry,2016,291 (28):14457
 

發布者:賽業(蘇州)生物科技有限公司
聯系電話:400-680-8038
E-mail:info@cyagen.com

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