細胞和病毒生產的放大培養面臨挑戰。當需要生產量增加千倍時,細胞培養瓶對于工業規模生產是不可行的。
微載體為生物反應器中貼壁細胞的生長提供了方便, 微載體充當貼壁細胞可附著的支架,允許它們增殖,而生物反應器使細胞-微載體復合體自由懸浮在培養基中。因此,貼壁細胞也可以像懸浮細胞那樣生長,從而簡化了放大培養,并允許利用現有的資源用于過程優化和生產。
微載體細胞計數的難題
細胞計數和活力是優化和監測大規模生物生產的關鍵參數。
傳統方法的微載體的細胞計數耗時耗力,且計數結果不準確,需要離心樣品、PBS重懸、胰蛋白酶消化細胞和臺盼藍或者結晶紫染色等多個步驟來計數在微載體上生長的細胞。
細胞計數影響因素:
步驟多,消耗時間長
細胞結團問題
胰酶消化不完全
細胞釋放不完全
微載體干擾細胞計數結果
NucleoCounting提供微載體細胞計數難題解決方案
Nucleocounting是一種微載體細胞計數和活力分析的精確可靠的方法。Nucleocounting方法通過熒光染色細胞核的方法檢測細胞,這些細胞用熒光染料DAPI進行標記,DAPI高度特異結合DNA,即使在有細胞碎片的情況下,也能精確檢測細胞核。
通過獨特的預包埋有熒光染料的Via1-Cassette™將細胞上樣、熒光染色、腔體細胞計數組合到一個工作流程,然后將Via1-Cassette™裝載到計算細胞數量和存活率的NucleoCounter® NC-200™機器卡槽中。
NucleoCounting節省微載體細胞計數的時間,計數精確可靠
與傳統的胰蛋白酶消化方法相比,NucleoCounting工作流程的去除了幾個離心,移液和孵育步驟。 整個細胞計數過程在不到5分鐘內完成。
ReagengA100 可以完全將細胞從微載體上消化下來,消除細胞結團的影響。此外,微載體不含細胞核,不會被DAPI染料計數,不干擾細胞的計數結果。
此外,NuclecounterNC200產品符合GMP 要求,能夠進行21CFRpart11 電子簽名,提供3Q 認證,且該產品無需清洗和無需校正,享受零成本售后服務。