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雙螺旋基因:教你怎樣快速鑒別溫和氣單胞菌與嗜水氣單胞菌

瀏覽次數:3677 發布日期:2016-11-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

今天給大家介紹氣單胞菌屬的另一個具有運動性的細菌——溫和氣單胞菌(Aeromonas sobriaAs

溫和氣單胞菌的生長特性

溫和氣單胞菌屬于弧菌科,產氣單胞屬,革蘭氏陰性菌,菌體呈短桿狀,單側有鞭毛,具有運動性,無莢膜,無芽孢。在普通瓊脂培養基生長良好,菌落呈白色和淺黃色半透明的圓形,邊緣整齊,中央有凸起,表面光滑,在血瓊脂上產生β溶血。

溫和氣單胞菌的致病性

與嗜水氣單胞菌一樣,溫和氣單胞菌同樣分布廣泛,存在于淡水、污水、土壤,人的食物鏈中、供水系統中,可致使人、畜禽、魚、甚至兩棲類、爬行類動物患病,同樣是是人—畜—魚共患病病原。溫和氣單胞菌可是一點都不溫和哦,致病能力比嗜水氣單胞菌還要強,主要的毒力因子有溶血素、氣溶素、細胞毒性腸毒素、脂酶和蛋白酶等外毒素。感染人類可導致的常見疾病有劇烈水樣腹瀉或慢性腹瀉(持續10天或以上)、蜂窩性組織炎、敗血癥等,非常見疾病有肌肉溶解、出現壞疽、腹膜炎、敗血癥肺炎、膽囊炎和骨髓炎等;溫和氣單胞菌常與嗜水氣單胞菌混合感染魚類,出現內臟器官水腫、組織出血、潰爛等癥狀,往往給養殖業帶來慘重的損失。

鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的方法

主要有微生物培養法、免疫學法和分子生物學方法:

微生物培養法,采用選擇性培養基鑒定培養法和生化試驗鑒定法;通過不同的生化反應可以鑒別兩者;

免疫學方法主要有酶聯免疫吸附試驗、單克隆抗體—膠體金檢測法等;

分子生物學方法有聚合酶鏈式反應技術、多重PCR法、基因測序和分子標記等方法;雙重PCR或多重PCR法,利用16sRNA和毒力基因,如甘油磷脂膽固醇酰基轉移酶基因、氣溶素基因、溶血素基因、細胞毒性腸毒素基因、熱不穩定性細胞興奮性腸毒素基因、熱穩定性細胞興奮性腸毒素基因,兩種或兩種以上的基因進行擴增,可以鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌。

以上方法各有特點,但在實際生產應用中,表現出檢測時間長、操作步驟多、準確率低、敏感性和特異性不足等。

小編為大家介紹一種分子生物學方法中的環介導等溫擴增方法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),該技術根據靶基因的6個區域設計4種特異性引物,利用一種鏈置換DNA聚合酶,持續恒溫60~65℃保持45~60min,即可完成擴增。首次成功應用LAMP法擴增的水產動物病原菌是遲緩愛德華氏菌,目前環介導等溫擴增技術已成功應用于檢測多種氣單胞菌,利用LAMP法能快速、便捷、準確有效地鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌,且無需專業背景技術人員和昂貴分子檢測儀器,為基層臨床診斷提供技術支持,同時能作為大量樣品的篩查方法和結果的初篩判斷。

目前,廣州雙螺旋基因技術有限公司推出的ZYD-S1恒溫熒光分子檢測儀,配套使用有嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的恒溫熒光檢測試劑,其優點是操作步驟少、簡單,擴增速度快,用時短,結果精準、直觀。

發布者:廣州雙螺旋基因技術有限公司
聯系電話:020-85671013
E-mail:service@dhelix.cn

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