BIOG細菌DNA提取試劑盒使用說明書
運輸條件：常溫運輸
貨 號：51037: 50次反應
51038: 100次反應
產品特點
◎提取DNA純度高，無抑制劑，A260/A280
為1.7-1.9；
◎產率高，同樣的樣本量提取的DNA更多；
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑，安全無毒；
◎對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌有較好的提取效果。
試劑盒組成
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組分 |
50次 |
100次 |
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吸附柱和收集管 |
各50個 |
各100個 |
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裂解液I |
12 mL |
24mL |
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裂解液Ⅱ |
12 mL |
24mL |
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析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
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洗滌液 |
9 mL |
18 mL |
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洗脫液 |
12mL |
24 mL |
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消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
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說明書 |
1份 |
1份 |
產品介紹
BIOG DNA Bacteria Kit適用于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌。對于細菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細菌芽孢等須首先破壁處理。BIOG DNA Bacteria Kit采用復合消化液消化菌體中的蛋白質，使細胞DNA更容易釋放出來，因而本試劑盒DNA提取產率較高。BIOG DNA Bacteria Kit采用了最新的離子膜技術并反復優化了裂解液和洗脫液配方，提取得到的DNA純度更高，最大限度地去除了蛋白、脂類等雜質污染，可以直接應用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。
操作步驟：
1.請自行準備：無水乙醇、PBS水及1.5mL離心管。
2.取出析出液和洗滌液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL無水乙醇；9mL加入51mL無水乙醇。
b) 洗滌液：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇。
c) 配制好的析出液如出現沉淀，可在37℃溶解，搖勻后使用。
3.細菌處理：將收集的細菌5,000 rpm離心3分鐘，棄上清，加入200μLPBS，振蕩混勻，5,000 rpm離心3分鐘，徹底棄上清。
4.a) 對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌，加入200μL裂解液Ⅰ，懸浮沉淀，37℃放置30分鐘。
b) 對于細菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細菌芽孢等須首先自行進行破壁處理，處理結束后進行步驟5操作。
5.加入200 μL 裂解液Ⅱ，20μL消化液，充分振蕩混勻，56℃水浴10 分鐘。
6.加入600μL析出液，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響DNA的提取與后續實驗。
7.將吸附柱放入收集管內，取上述溶液600μL轉入吸附柱內，靜置2 分鐘，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
8.將剩余400μL液體轉入上述吸附柱內，重復操作步驟7。
9.將吸附柱放回收集管內，加500μL 洗滌液至吸附柱內，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
10.將吸附柱放回收集管內，12,000 rpm 4℃離心2 分鐘，離去殘留的洗滌液。
11.取出吸附柱，放入新的1.5 mL 離心管內，加入50-200 μL 洗脫液，靜置3分鐘，12,000 rpm 4℃ 離心2分鐘，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
注意事項：
- 析出液、洗滌液含有刺激性化學物質，操作過程請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。
- 細菌量建議不高于107。
- 裂解液Ⅱ如有白色絮狀物析出屬正常現象，置于37℃水浴中溶解即可。
儲存、運輸和有效期
本試劑盒可常溫運輸，室溫（15-25℃）保存，有效期為12個月，消化液請于-20℃存放，避免反復凍融，裂解液Ⅰ請于4℃存放。
質量控制
本產品經嚴格的質量檢驗證明，無生物污染
注意 本產品僅用于科研
常州百代生物科技有限公司
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