大鼠敞箱實驗/曠場實驗方法總結(jié)

一.基本原理

動物進(jìn)入敞箱后因其對新異環(huán)境的恐懼而主要在敞箱內(nèi)靠周邊的區(qū)域活動，在中央?yún)^(qū)域的活動較少。然而，動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動（包括運動、飲水或進(jìn)食）的動機(jī)，因而形成沖突狀態(tài)。抗焦慮劑（如地西泮）可解除這種沖突狀態(tài)，表現(xiàn)為在不改變活動計數(shù)的劑量明顯增加大鼠進(jìn)入敞箱中央?yún)^(qū)域的次數(shù)及在中央?yún)^(qū)域逗留的時間（Stefanski法）或增加大鼠在中央?yún)^(qū)域的飲水時間（Stout-weiss法），致焦慮劑（如FG7142）則使飲水時間明顯減少。

二.操作步驟

Stefanski法：實驗裝置為一圓形敞箱，直徑80cm，高30cm；敞箱底部中央劃有直徑分別為35cm和50cm的內(nèi)外兩個圓圈，內(nèi)圈所包含的區(qū)域為中央?yún)^(qū)；靠近底部的側(cè)壁上對稱裝有3個光電管，并可通過畢露電視觀察老鼠的活動情況。實驗在弱光照明、65dB的白噪聲(背景聲)下進(jìn)行。實驗用雄性Wistar大鼠，體重200-240g。將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內(nèi)大鼠總的活動計數(shù)、進(jìn)入敞箱外圈的次數(shù)（從敞箱周邊向中央?yún)^(qū)域運動約為15cm為一次）和在敞箱中央?yún)^(qū)域逗留的時間。

Stout-weiss法：（敞箱飲水實驗，the open field drink test，OFDT），實驗用一36cm*36cm*36cm的透明有機(jī)玻璃箱，其底部漆成黑色，頂部敞開（此實驗儀器可由上海欣軟信息科技有限公司提供）。箱子的中煙倒著懸掛一水瓶，瓶嘴離地10cm；箱的上方離地面60cm處有一25w的白熾燈用于照明。除一面外，箱體其余三面都用黑色隔板遮擋，以排除額外的的可見刺激。實驗前至少三天每天撫摸大鼠1min，以減少非特異性應(yīng)激對實驗的影響；實驗前3天每天僅飲水1h（下午3：00-4:00）。實驗時將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內(nèi)大鼠開始飲水的潛伏期、飲水時間（主要指標(biāo)）、靠近水瓶的次數(shù)及站立數(shù)等。

三 .注意事項與評價

（1）在每只大鼠實驗后，用5%的醋酸水溶液徹底清潔實驗箱，以防止嗅覺暗示傳遞給下一只大鼠。

 (2)敞箱實驗由于其設(shè)備簡單、操作簡便，在行為研究中使用非常普遍，多用來評價動物的運動活性等綜合行為。而作為焦慮模型只是近幾年才發(fā)展起來的，所獲得的實驗資料有限。因此，其穩(wěn)定性及可靠性還有待進(jìn)一步驗證，最好結(jié)合其它焦慮模型評價藥物的效應(yīng)。值得注意的是，丁螺環(huán)酮盡管在其它許多模型上不敏感，但在本實驗中0.3mg/kg即有抗焦慮作用。