BCA蛋白定量方案—最便宜的BCA蛋白定量分析試劑盒技術說明
精確的蛋白質(zhì)定量是蛋白質(zhì)相關實驗所必需的，這些實驗涉及分子生物學，細胞生物學，生物化學，發(fā)育生物學和神經(jīng)科學的研究課題。 最常用的蛋白質(zhì)定量分析方法主要是BCA法和Bradford法。 基于Bradford法的原理，會由于各種蛋白質(zhì)中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，導致不同蛋白質(zhì)測定時有較大的偏差，而且容易受到去污劑（Triton X-100、SDS…）的干擾。所以更多的權威機構和客戶會選擇BCA法檢測蛋白濃度，例如，F(xiàn)DA指定BCA試劑盒為新藥申報材料中蛋白質(zhì)檢測的唯一標準試劑。
BCA法實驗原理：堿性條件下，蛋白質(zhì)分子中的肽鍵結構能與Cu2+結合生成紫色絡合物，同時將Cu2+還原為Cu+。BCA試劑可靈敏特異的與Cu+結合，形成穩(wěn)定的有顏色的絡合物，562nm處有最高的吸收值，可在540-595nm測定其吸收值，顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。
Biovision的常規(guī)BCA蛋白定量試劑盒的優(yōu)點：
· 實驗操作簡單，便捷；
· 靈敏度高，檢測濃度下限達到25μg/ml；
· 測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質(zhì)的影響，可以兼容SDS、Triton X-100以及Tween 20等；
· 在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關系；
· 檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)小于Bradford法蛋白定量；
· 性價比無與倫比，單次實驗費用比國產(chǎn)試劑盒更低。
| 產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品說明 |
| BCA Protein Assay Kit II | Biovision | K813-5000 | 詳情 |
當然BCA法也有其不足之處，就是容易收到略高濃度還原劑的干擾，如：DTT、TCEP 和β-mercaptoethanol等。為此，作為全球生命科學公司的領導者，Biovision經(jīng)過探索攻堅，徹底完善了BCA的不足，推出市面上唯一一款可兼容高濃度還原劑的BCA試劑盒，K818-1000。可兼容：TCEP (20 mM), DTT (10 mM), β-ME (35 mM)
圖1. 高濃度還原劑條件下，Biovision試劑盒（K818-1000）的優(yōu)異表現(xiàn)
| 產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品說明 |
| BCA Protein Assay Kit - Reducing Agent Compatible | Biovision | K818-1000 | 詳情 |
