為何選用時(shí)間分辨熒光檢測：

我們知道，以常用熒光素作為標(biāo)記物的熒光免疫測定往往受本底熒光的干擾影響，例如包括樣本載體、血清成分、儀器激發(fā)光源的雜射光的干擾，使得靈敏度受到很大限制。時(shí)間分辨熒光免疫測定（timeresolvedfluorescenceimmunoassay，TR-FIA）是針對(duì)這缺點(diǎn)加以改進(jìn)的一種新型檢測技術(shù)。

時(shí)間分辨熒光免疫測定的基本原理是以鑭系元素銪（Eu）螯合物作熒光標(biāo)記物，利用這類熒光物質(zhì)有長熒光壽命的特點(diǎn)，延長熒光測量時(shí)間，待短壽命的自然本底熒光完全衰退后再行測定，所得信號(hào)完全為長壽命鑭系螯合物的熒光，從而有效地消除非特異性本底熒光的干擾。

我公司的HG-1000時(shí)間分辨免疫熒光分析儀用的就是該技術(shù)。

時(shí)間分辨熒光免疫測定使用的儀器:

時(shí)間分辨熒光免疫測定所用檢測儀器為時(shí)間分辨熒光分析儀，與一般的熒光分光光度分析儀不同，主要采用脈沖光源，照射樣品后即短暫熄滅，以電子設(shè)備控制延緩時(shí)間，待非特異本底熒光衰退后，再測定樣品發(fā)出的長鑭系熒光。檢測靈敏度可達(dá)0.2～1ng/ml。

試劑上：除了將試劑抗原或試劑抗體用鑭系元素銪（Eu）螯合物進(jìn)行標(biāo)記，試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，還利用了增強(qiáng)液使熒光信號(hào)增強(qiáng)，因?yàn)槊庖叻磻?yīng)完成后，生成的抗原－抗體－銪標(biāo)記物復(fù)合物在弱堿性溶液中，經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光信號(hào)甚弱。在增強(qiáng)液中可至pH2～3，銪離子很容易解離出來，并與增強(qiáng)液中的β-二酮體生成帶有強(qiáng)烈熒光的新的銪螯合物，大大有利于熒光測量。