羅氏FFPE 組織切片核酸純化試劑盒操作說明
瀏覽次數：7147 發布日期：2015-4-6
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High Pure FFPET DNA Isolation Kit基于離心柱法的抽提原理，免去DNA沉淀和有機試劑抽提的步驟，是快速核酸抽提的理想工具。
整個抽提過程僅需3小時（含脫蠟過程）；
獲得高DNA得率和質量；
在qPCR，芯片分析和測序等下游應用中獲得強大信號。 |
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圖1：從FFPET樣本中獲得高得率的DNA
柱形圖顯示了從3種不同乳腺癌或結腸癌異種移植組織的5um FFPET組織切片樣品中獲得的DNA平均得率。通常來說，在不同組織切片的樣品個體間存在一定的DNA得率變異。
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圖2：從樣品中抽提獲得高質量DNA，適用于多種下游應用。
在HT29異種移植FFPET樣本中抽提獲得DNA，再進行100,200,300,400bp片段長度擴增子的多重PCR。
泳道1和2：使用二甲苯進行脫蠟
泳道3和4：使用十六烷進行脫蠟
泳道5和6：多重PCR質控對照，核酸樣品為人全血中抽提的完整基因組DNA
圖2：從近期和長期保存的FFPET樣品中均可抽提獲得高RNA得率 | |
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結果：所有泳道中均出現4個清晰的目標條帶，表明High Pure FFPET DNA Isolation Kit能在FFPET樣本中抽提獲得高質量DNA，適用于CGH芯片分析，二代測序等對核酸模板質量要求高的下游應用。 |
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圖3：從樣品中抽提獲得高質量DNA，提高qPCR檢測靈敏度
作為qPCR實驗中的核酸模板，要求高質量DNA，即良好的核酸得率、純度和片段大小分布，并能高靈敏度和不偏倚地檢測到目標基因。取5ul DNA洗脫液，分別通過LightCycler 480 Real-Time PCR Instrument擴增檢測CycA（442bp）或myo（89bp）基因片段。
結果：High Pure FFPET DNA Isolation Kit抽提獲得的DNA樣品能在qPCR研究中獲得更高的檢測靈敏度（提前出線的Cq值）。
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圖4：將DNA應用于甲基化敏感性高分辨率熔解曲線分析（MS-HRM）等前沿應用
將不同腫瘤研究樣本的DNA抽提物經重亞硫酸鹽處理，通過LightCycler 480 Instrument進行APC基因的MS-HRM分析，不同腫瘤組織的APC基因具有不同程度的甲基化。
結果：使用High Pure FFPET DNA Isolation Kit抽提獲得的DNA是MS-HRM分析的理想模板。在該研究中，共發現3中不同程度的甲基化范圍：樣本A的APC甲基化水平在10-100%，樣本B的甲基化水平在0-1%，樣本C的APC不存在甲基化。 | |
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產品信息 |
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產品 |
目錄號 |
包裝規格 |
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High Pure FFPET DNA Isolation Kit |
06 650 767 001 |
50次抽提反應。 | |
閱讀原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015040006.html
