BioTNT PCR Array的技術(shù)特點
瀏覽次數(shù):807 發(fā)布日期:2014-12-23
來源:BioTNT
1、前沿性:
結(jié)合了實時定量PCR技術(shù)靈敏可靠的優(yōu)勢以及現(xiàn)下最熱的微列陣技術(shù);
2、高通量:
檢測多種基因表達量,是分析信號通路或某生物學(xué)功能相關(guān)基因表達狀態(tài)的首選工具;
3、準(zhǔn)確性:
完全克服了常規(guī)雜交芯片假陽性率高的缺陷;
4、便捷性:
完全克服了常規(guī)雜交芯片海量數(shù)據(jù)難于有效分析的缺陷,使用方便,只要有定量PCR儀就可以進行該實驗;
5、 廣泛性:
其應(yīng)用領(lǐng)域十分廣泛,主要有腫瘤、免疫、發(fā)育、代謝、干細(xì)胞、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞信號通路、心血管疾病、miRNA靶基因等。
相比于PCR array技術(shù),表達譜芯片和轉(zhuǎn)錄組測序可以實現(xiàn)全基因組水平的檢測,但只能了解一些常見的研究物種中不同表型或者疾病類型間,有哪些基因發(fā)生了基因表達的變化。這兩項技術(shù)進行基因篩選后,都需要經(jīng)過驗證。如果只檢測的是幾個特定的基因,qPCR技術(shù)是大家會普遍采用的。
qPCR技術(shù)雖然比較成熟,但是在實際研究中也有許多需要注意的事項,比如內(nèi)參的選擇是否合適,體系的優(yōu)化以及引物設(shè)計等等,都會對實驗結(jié)果有很大的影響。因此,針對一些有候選通路或者基因的研究,這些研究中所關(guān)注的基因比較多,這個時候可以考慮結(jié)合定制PCR array技術(shù)進行相應(yīng)的研究,可以實現(xiàn)批量基因的驗證。
我們PCR Array產(chǎn)品的特點和優(yōu)勢:
BioTNT 同時提供自產(chǎn)QPCR Array 產(chǎn)品,并提供定制QPCR Array 產(chǎn)品。傳統(tǒng)的定制PCR array產(chǎn)品只能檢測定制的一些基因,如果客戶不需要檢測這么多基因或者還需要檢測定制以外的其它基因,我們可以根據(jù)客戶的實際所需的基因數(shù),為客戶設(shè)計其所需的特定的BioTNT 自產(chǎn)QPCR Array 產(chǎn)品。
優(yōu)勢:
1、靈活的指標(biāo)檢測:
能根據(jù)客戶的實際要求,定制自產(chǎn)的QPCR Array 產(chǎn)品
2、嚴(yán)格的樣本指控:
對樣本質(zhì)量進行嚴(yán)格的把控,對客戶所提供的樣本進行RNA 抽提后,我們都會采用NanoDrop測定RNA濃度,OD比值(260nm和280nm處的OD值),并評測RNA質(zhì)量。質(zhì)量符合要求的才會進行下一步實驗。實驗前還會對CDNA 選測內(nèi)參基因進行第二次質(zhì)檢;兩次質(zhì)檢全部合格后,進行正式QPCR Array 實驗;這樣能避免因樣本不合格而進行實驗所造成的損失。
3、優(yōu)質(zhì)的引物選擇:
引物自己設(shè)計,驗證,篩選,對于客戶所需的每個基因,我們都會設(shè)計兩對引物,用我們自己的陽性模板驗證,然后從中篩選中較優(yōu)的引物作為客戶正式實驗的引物。
4、配套的分析服務(wù)
利用儀器配套軟件計算PCR芯片中的每個基因的Ct值。按照BioTNT QPCR Array 分析軟件,分別copy test sample和control sample 的CT值到excel 表中。根據(jù)excel 表軟件,計算是否符合質(zhì)量控制,選擇內(nèi)參基因來計算每個基因的表達上調(diào)或者下調(diào)的情況,為客戶篩選出有價值的基因。