1.先進性“使用前的檢查”，一切正常后打開比色池暗箱蓋，接通電源，預熱20分鐘。

2.調節波長選擇旋鈕λ至所需波長，靈敏度調節鈕放在“1”位置。調節“0”電位器，校正電表指針指0。

3.將裝有參比溶液及待測溶液的比色皿按順序放入比色架中，使參比溶液處于光路位置，輕輕蓋上比色皿暗箱蓋，使光電管受光，調節“100%”電位器至電表指針至滿刻度（T100%或A=0）處。

4.如果放大器靈敏度不合適（即步驟3中不能調滿刻度），可重新調整靈敏度調節旋鈕（放大器靈敏度有3檔，是逐漸放大的，“1”最低，其選擇原則是保證能使空白時調滿刻度，盡可能采用靈敏度較低檔，，這樣儀器將有更高的穩定性），如果靈敏度不夠，可逐漸升高，但改變靈敏度后，必須按步驟3重新校正“0”和“100%”。

5.按步驟3連續調整“0”和“100%”，直至穩定，至此調校完畢，即可進行測定工作。

6.輕輕拉動比色皿架拉桿，使待測液置于字光路位置，即可讀取表頭指針所指的讀數（T%或A值）。

7.測量完畢，打開比色皿暗箱蓋。

8.實驗結束，關閉電源，將比色皿取出洗凈，用軟紙擦凈比色皿架及暗箱蓋，蓋上暗箱，散熱后，罩好儀器罩。

注意事項：

1、使用721型分光光度計時，連續光照光電管的時間不可太長，以免光電管疲勞。不測定時，必須打開暗箱蓋，切斷光路，以光電管的使用壽命。

2、根據需要選擇使用不同厚度的比色皿，同一厚度的一套比色皿應檢查使用。方法是使一套比色皿盛裝同一種有色溶液，測其透光率相對值，該值最大相差不應超過0.5%。

3、拿取比色皿時，只能用手捏毛玻璃片，且不可用手捏透光面，以免污損而影響透光性能。比色皿外壁的水珠應用鏡頭紙或柔軟的吸水紙輕輕揩擦，不可用用硬紙或用力擦拭。

4、比色皿裝溶液時，以裝滿2/3為宜，不可過滿或太淺，以防拉動比色皿架時濺出或影響測定。對系列溶液的測量，應從稀到稠順序依次進行，以減少誤差。

5、比色皿應用鹽酸-乙醇（1:2）混合液或1:1HNO3溶液浸泡，再用自來水，蒸餾水洗滌，不可用堿液、氧化性強的洗滌液（如鉻酸洗液），以防腐蝕或造成粘結縫開裂。也不能用毛刷洗，以免損壞其透光面，更不能在爐子、火焰上或烘箱內加熱干燥。

6、在分析工作中，根據有色溶液的濃度的大小選用適合規格的比色皿，以使溶液吸光度控制在0.2-0.8范圍內，一面減少測量誤差。