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Ig亞類/鑒定/分型試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):3540 發(fā)布日期:2011-5-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
 
小鼠單抗Ig類/亞類鑒定用ELISA試劑盒使用說明書
 
您好!感謝您選擇了我們的產(chǎn)品,請您在讀完此說明書后再開始您的實(shí)驗(yàn),這對您順利完成實(shí)驗(yàn)很有幫助。
一、試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA)。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng),最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。
二、組成成分:
酶標(biāo)板     含自封袋1個(gè)
192孔
 標(biāo)本稀釋液
30ml
通用陽性對照     內(nèi)含小鼠 Ig(G1\G2a\G2b\G3\M\A)
2ml
顯色劑A
20ml
酶標(biāo)二抗         6種
6×4ml
顯色劑B
20ml
 20×清洗液
50mL
反應(yīng)終止液
20ml
 封板膜
4張
 說明書和加樣圖
各1份
 
三、使用范圍:用于小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。
四、使用方法:
1首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。
2取出酶標(biāo)板。每個(gè)標(biāo)本需要6孔,陽性對照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。
3將細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)50μl加入酶標(biāo)微孔板,每個(gè)標(biāo)本加6孔,陽性對照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個(gè)標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl,通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍(lán)的那個(gè)孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔50μl)終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長,630nm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5實(shí)驗(yàn)無效,需要重做。
 
五、產(chǎn)品特點(diǎn):高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。當(dāng)然您如果覺得很多試劑自己可以準(zhǔn)備想省一筆費(fèi)用,那您可以登陸網(wǎng)站選擇我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備的簡裝抗體鑒定產(chǎn)品C030215。當(dāng)然您也可以下次把標(biāo)本交給我們來做并且不會增加太多費(fèi)用!!
六、保存條件:2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。
 
七、注意事項(xiàng):
1雖然本試劑盒過期后很久還有使用價(jià)值但還是請您在有效期內(nèi)使用。
2在檢測腹水類單抗時(shí)要稀釋到1/5萬,雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果。
3手洗板子時(shí)一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,最后要拍干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時(shí)一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個(gè)在手工洗板時(shí)對結(jié)果很重要。
4一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。
5拿放板子時(shí)不要劇烈抖動,以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。
6出現(xiàn)異常結(jié)果請隨時(shí)咨詢我們。
 
特別提示:不具備ELISA基礎(chǔ)知識和操作的人員不要完成此實(shí)驗(yàn)或類似實(shí)驗(yàn),因?yàn)檫@可能會給您帶來錯(cuò)誤的結(jié)果和不必要的損失
發(fā)布者:鄭州金賽爾生物科技有限公司
聯(lián)系電話:0371-86020264 13523424766
E-mail:genecell@163.com

標(biāo)簽: Ig亞類鑒定
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