蘇木精-伊紅（HE）染色

瀏覽次數(shù)：4251　發(fā)布日期：2010-9-26　來源：www.pricells.com.cn

蘇木精-伊紅（HE）染色

染液制備：

1. 蘇木精染液

（1）稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中；

（2）加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液；

（3）母液可長期保存。用蒸餾水以1：20稀釋母液即成工作液。工作液也較長時(shí)間儲存，但每次染色前宜過濾，去除氧化膜；

2. 伊紅染液

伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液；

染色步驟：

1. 用37℃的溫BSS漂洗3次，每次20s—1min；

2. 用中性福爾馬林固定30min；

3. 用蒸餾水漂洗1次，再用蒸餾水稀釋的蘇木精液（1/20）染10min；

4. 先用自來水沖洗幾次，而后置入1% NaHCO₃液中漂洗至藍(lán)紫色；

5. 在放入伊紅水溶液中染30s—1min；

6. 用蒸餾水沖洗，迅速通過丙酮2次，每次3—5min；

7. 通過2：1丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；

8. 通過1：2丙酮/二甲苯3次，每次1—2min；

9. 放入純二甲苯5—10min，用光學(xué)樹脂封片后觀察；

10. 把蓋片置載物玻片上，令小蓋片細(xì)胞面向上，用樹膠封存，再覆以較大蓋片；

結(jié)果：

原代細(xì)胞核染成紅色，胞質(zhì)染成藍(lán)紫色；

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