高通量疫苗、獸藥研發(fā)及獸藥殘留檢測公共平臺介紹
作者: 潘剛（密理博中國生命科學(xué)部）
前言：本文摘選自《××農(nóng)業(yè)大學(xué)高通量疫苗、獸藥研發(fā)及農(nóng)藥殘留檢測公共平臺的認(rèn)證報告》，分為上下兩篇。該系列分為高通量疫苗研發(fā)技術(shù)簡介，獸藥研發(fā)及農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)簡介，高通量疫苗及、獸藥研發(fā)及農(nóng)藥殘留檢測公共平臺共三期，希望對廣大動物科學(xué)研究者有所幫助。
【平臺簡介】
高通量的疫苗、獸藥研發(fā)及獸藥殘留檢測公共平臺主要采用懸浮芯片技術(shù)及獨(dú)特的微毛細(xì)管技術(shù)的流式細(xì)胞術(shù)為主要研發(fā)平臺。對病原體的檢測主要采用PCR技術(shù)擴(kuò)增后，應(yīng)用懸浮芯片的xTAG編碼小球進(jìn)行高通量的篩查，并可利用xMAP編碼小球來進(jìn)行膜組分的蛋白質(zhì)組學(xué)分析。采用8通道的微毛細(xì)管流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)及抗原表位的鑒定。特別重要的是在后期篩選檢測疫苗時，配合高通量的全自動化樣品處理系統(tǒng)、高通量的懸浮芯片檢測系統(tǒng)及6色熒光8參數(shù)檢測的easyCyte 8HT（蛋白質(zhì)分析的4G平臺），將大大加快疫苗的研發(fā)及篩選工作，并同時得到大量的高質(zhì)量的體內(nèi)和體外的實驗數(shù)據(jù)，這可以大大提高疫苗研發(fā)的質(zhì)量。
【平臺組成】
- 高通量樣品處理系統(tǒng)：Bio-TekELx405樣品處理系統(tǒng)
- 懸浮芯片檢測及研發(fā)平臺：LuminexFLEXMAP 3D
- 微毛細(xì)管流式細(xì)胞檢測及研發(fā)平臺：easyCyte 8HT
Luminex FLEXMAP 3D懸浮芯片檢測及研發(fā)平臺
【FLEXMAP 3D簡介】
FLEXMAP 3D系統(tǒng)由Millipore攜手Luminex公司，聯(lián)手打造的新一代高通量懸浮芯片分析和檢測系統(tǒng)。該系統(tǒng)較上一代Luminex200在速度、多路檢測和工作流程上都有了質(zhì)的飛躍。借助于xMAP技術(shù)，能極大提高臨床研究、制藥、疫苗研發(fā)及學(xué)術(shù)核心實驗室的研究水平和工作效率。
【三大突出特點(diǎn)】
1．創(chuàng)新的三色染色技術(shù)，最多能同時分析和檢測微量樣品中的500個指標(biāo)。FLEXMAP 3D系統(tǒng)與Luminex200系統(tǒng)最大的創(chuàng)新點(diǎn)在于微球的染色技術(shù)，采用獨(dú)特的三色染色技術(shù)，能同時完成對一個微量樣品進(jìn)行多達(dá)500種不同待測物的分析和檢測；
2．雙通道進(jìn)樣系統(tǒng)，極大提升數(shù)據(jù)獲取速度和質(zhì)量。2μl/s的高速雙通道進(jìn)樣系統(tǒng)，可在一小時內(nèi)最多獲得48,000個高質(zhì)量的分析數(shù)據(jù)；
3．96孔板與384孔板兼容。提供兩種孔板選擇，滿足不同實驗通量的需求。
【整合優(yōu)勢】
FLEXMAP3D系統(tǒng)將SD鞘液分配系統(tǒng)、主機(jī)及操作平臺三者合而為一，具有高度整合的特性，系統(tǒng)優(yōu)勢主要有：
- 通量更高：每孔檢測可多達(dá)500種檢測物
- 速度更快：雙通道處理增加了進(jìn)樣速度，一小時內(nèi)最多可平行檢測48,000個指標(biāo)
- 選擇更多：96孔板與384孔板均適用
- 操作更簡單：自動開機(jī)，關(guān)機(jī)有常規(guī)操作，進(jìn)一步簡化操作流程。
- 軟件系統(tǒng)更靈活。
【Milliplex Biomarkers配套研究工具】
多達(dá)150多種Biomarkers可供選擇，涉及Biomarker研究的12個應(yīng)用領(lǐng)域；
- 檢測多達(dá)5個物種，包括人、小鼠、大鼠、非人靈長類和狗；
- All in one Box，試劑盒中提供了實驗所需的所有試劑；
- 獨(dú)特的磷酸化位點(diǎn)檢測技術(shù)Milliplex EpiQuant創(chuàng)新專利，通過該技術(shù)，或?qū)崿F(xiàn)磷酸化蛋白與總蛋白同孔檢測及同一蛋白的多個磷酸化位點(diǎn)同時檢測，實現(xiàn)定量檢測磷酸化水平，并提供更多的磷酸化位點(diǎn)特異性抗體，在10-50μl 樣本中實現(xiàn)更多指標(biāo)檢測，已可實現(xiàn)41個磷酸化蛋白/位點(diǎn)同時檢測，通用的Buffer體系，解決了不同磷酸化蛋白實驗體系互不兼容的問題；
- 20多年遍及全球及全球各大制藥公司的Biomarkers專業(yè)服務(wù)，更為國內(nèi)用戶提供BOG專業(yè)服務(wù)。
微毛細(xì)管流式細(xì)胞檢測及研發(fā)平臺
【簡介】
新一代的easyCyte 8HT與傳統(tǒng)采用鞘流系統(tǒng)的流式細(xì)胞儀不同，是采用獨(dú)特微毛細(xì)管細(xì)胞專利分析技術(shù) (Micro-Capillary)的新一代流式細(xì)胞分析系統(tǒng)，它能對細(xì)胞等生物粒子的理化及生物學(xué)特性（細(xì)胞大小、DNA/RNA含量、細(xì)胞表面抗原表達(dá)等）進(jìn)行定量、快速、客觀多參數(shù)相關(guān)檢測分析的新技術(shù)。它借鑒了熒光顯微鏡技術(shù)與血球計數(shù)原理，同時利用熒光染料、激光技術(shù)、單抗技術(shù)以及計算機(jī)技術(shù)的發(fā)展，大大提高了檢測速度與統(tǒng)計精確性，而且從同一個細(xì)胞中可以同時測得多種參數(shù)，為生物醫(yī)學(xué)與臨床檢驗學(xué)發(fā)展提供了一個全新的視角和強(qiáng)有力的手段。
【特色與優(yōu)勢】
1．樣品需求量少，1000-10000個細(xì)胞/分析
2．無鞘液，最大程度減少廢液產(chǎn)生，每8小時產(chǎn)生的廢液量少于50ml
3. 儀器體積小，可直接放入超凈臺中進(jìn)行無菌操作
4．高壓注射泵與PEEK管路系統(tǒng)雙重保證，免除流路阻塞(Clog)的煩惱
5．固化細(xì)胞流路，建立自穩(wěn)流系統(tǒng)
6．上樣體積精確可測，可實現(xiàn)直接的細(xì)胞絕對計數(shù)
【微毛細(xì)管細(xì)胞分析的基本原理】
待測標(biāo)本制備成單細(xì)胞懸液通過熒光染色后進(jìn)入微毛細(xì)管的流動室，由于微毛細(xì)管的虹吸作用樣品流中細(xì)胞排成單列逐個經(jīng)過激光聚焦區(qū)。如果我們將細(xì)胞中感興趣的部分特異性的標(biāo)上熒光染料，那么這些染料將在細(xì)胞通過激光檢測區(qū)時受激光發(fā)出特定波長的熒光，通過一定波長選擇通透性的濾色片，我們可將不同波長的散射光、熒光信號區(qū)分開來，并送到不同的光電倍增管中，經(jīng)過一系列的信號轉(zhuǎn)換、放大，數(shù)字化處理，我們就可以在計算機(jī)直觀的統(tǒng)計染上各種熒光染料的細(xì)胞各自的百分率。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料，我們可以利用FSC、SSC同時測定一個細(xì)胞上的多種不同特征。
Guava專利的微毛細(xì)管系統(tǒng)
傳統(tǒng)的鞘液流系統(tǒng)
【應(yīng)用范圍】
Micro-Capillary與單克隆抗體技術(shù)結(jié)合，可對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)抗原、癌基因蛋白及膜受體進(jìn)行定量檢測，流式免疫熒光技術(shù)不僅能將表達(dá)位點(diǎn)的細(xì)胞群區(qū)分開來，而且還能進(jìn)一步區(qū)分各細(xì)胞亞群，及對抗原表位進(jìn)行定量和定性檢測。可廣泛應(yīng)用于疫苗研發(fā)，新型獸藥研制及農(nóng)藥殘留檢測等。
Guava easyCyte 8HT系統(tǒng)配備488nm與635nm的高功率全固態(tài)半導(dǎo)體激光器，全固態(tài)半導(dǎo)體激光器使用壽命在25000小時以上。
easyCyte 8HT配置為：488nm與635nm固態(tài)激光器；FSC與SSC檢測器；所有6色熒光檢測皆適用PMT檢測器；96孔板與10個Tube單管上樣；InCyte數(shù)據(jù)獲取及分析軟件，兼容IC50/EC50分析功能。
適用于目前全部的細(xì)胞生物學(xué)分析實驗。具有很好的開放型與適用性。軟件操作簡單，無需專人管理，體積小巧不需要專門房間放置。
更多詳細(xì)參數(shù)，請進(jìn)入密理博流式技術(shù)空間>>
若希望了解更多此平臺的相關(guān)信息或希望索取《××農(nóng)業(yè)大學(xué)高通量疫苗、獸藥研發(fā)及農(nóng)藥殘留檢測公共平臺的認(rèn)證報告》，請?zhí)顚懴卤恚?/SPAN>
https://millipore.wufoo.com/forms/cell-culture-protein-purification/
