亚州综合一区_啪啪av大全导航福利_韩国一级片免费看_国产对白做受_夜夜躁很很躁日日躁2020_第一色网站

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 植物病毒分離方案

植物病毒分離方案

瀏覽次數:4634 發布日期:2008-12-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
植物病毒分離方案
 
方案一:
帶病毒的植物葉、莖、果實、根等粉碎后—20℃冰凍后制成勻漿→用0.5M,PH7.0檸檬酸緩沖液抽提→雙層紗布過濾→濾液加入6%PEG(MW6,000)及3%Nacl,充分攪拌40分鐘,置冰箱4℃過夜→高速冷凍離心機8×50ml轉頭,7000rpm,4℃離心20分鐘,棄上清,取沉淀→沉淀是浮于0.005M,PH8.5的硼酸緩沖液(含0.05M尿素或1%,Triton X-100)中,7000rpm,4℃離心20分,取上清液→超速離心:10%~40%蔗糖梯度,日立P40ST轉頭30,000rpm,4℃離心3小時→每管自上而下收集成30管,每管約400μl,分別做260nm及280nm O.D.,繪成曲線,收集病毒帶(峰前后收集管)。根據260nm及280nm的O.D.值的比值估計樣品的純度
 
方案二:
帶病毒的植物葉、莖、果實、根等粉碎后—20℃冰凍后制成勻漿→加5倍體積的0.1M,PH8.2的硼酸緩沖液(含2%PVP,2%尼古丁,0.01M EDTA和0.2%硫基乙醇)攪拌,雙層紗布過濾→濾液在高速冷凍離心機6,000rpm,4℃離心20分→取上清液,加入6%PEG(MW6000),0.1M Nacl和1% Triton X-100,冰浴中攪拌至完全溶解,4℃過夜→高速機10,000rpm,4℃離心30分鐘→取沉淀,懸浮于0.01M PH7.2的磷酸緩沖液(含0.001M EDTA和0.1% PVP)10,000rpm,4℃離心30分鐘→取上清液,P40ST轉頭每管內鋪5ml用以上懸浮液配置的20% w/w蔗糖(分析純),上部鋪上清液至距管口3mm,35,000rpm,4℃離心3小時→取沉淀,用以上懸浮物稀釋后10,000rpm,4℃離心20分→取上清液,P40ST轉頭,10%~40%蔗糖梯度,每管樣品約1ml,28,000rpm,4℃,3.5小時→從上部開始收集成30管,每管約400μl,分別測O.D.,繪成管數(橫坐標)對O.D.(豎坐標)曲線,找到病毒峰所在離心管(取3-5管)→稀釋后40,000rpm,4℃離心2小時→沉淀,懸浮即為純病毒成份。
 

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 手机看片国产福利 | 亚洲69p| 泰坦尼克号中文国语版免费观看 | 青青草狠狠干 | 在线看国产一区二区 | 国产一级片一区 | 国产精品久久久久久久久免费蜜臀 | 欧美一区=区三区 | www.777熟女人妻 | 美女被触手狂揉下部动图 | 亚洲色欲色欲WWW在线看小说 | porno—360hd18| 国内一级大片 | 日韩精品一区二区三区中文在线 | 欧美xxx日本 | 99精品欧美 | 最新中字乱码无限2021 | 熟女人妇交换俱乐部 | 国产精品.www| 人妻少妇精品无码专区二区 | 国产三级精品三级在线专区1 | 樱桃视频免费观看 | 91av日本 | 特级毛片www欧美 | 女性裸体不遮胸平台 | 日本日韩中文字幕 | 91最新在线观看 | 无码丰满熟妇JULIAANN与黑人 | 自拍偷拍色综合 | 制服丝袜国产AV无码 | 一级黄色片在线看 | 成人av资源| 国产精品久久一区二区三区不卡 | 精品麻豆一卡2卡三卡4卡乱码 | 亚洲天堂影院在线观看 | 亚洲国产精品一区二区成人片 | 四级毛片在线播放 | 精品人伦一区二区三 | 蜜臀久久99精品久久久久久网站 | 小早川怜子一区二区的演员表 | 国产亚洲欧美色狠一区二区 |