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不同質量的內切酶,實驗結果大不相同!

瀏覽次數:3970 發布日期:2009-4-21  來源:http://
不好的內切酶常常被各種蛋白酶、非特異外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的內切酶切割DNA,則會在切割底物的同時破壞產物的末端(外切酶偷偷切掉1、2個bp,瓊脂糖電泳卻看不出來),讓后續的連接、克隆和表達出現問題!
   而NEB提供的內切酶大部分都經過重組改造,在最大程度上避免了外切酶污染的問題,讓你的基因安全可靠!
好的內切酶
不好的內切酶
· 活性高
· 品質穩定,保存期長
· 無其它核酸酶污染(包括外切酶污染)
·活性不高
·保存一段時間后活性迅速下降
·有其它核酸酶的污染(包括外切酶污染)

質粒DNA
 酶切反應 
好的內切酶切割

   不好的內切酶切割

 
完整的DNA片段


      
連接
   完整的DNA片段
           少量的外切酶損壞DNA末端
  

           不完整的DNA片段+1、2個dNTP
      
連接
 
成功連接,克隆并表達
連接失敗,克隆不成功,無法表達或產物不正確
NEB EcoRV: Survival rate=49/50
Company T EcoRV: Survival rate=3/50

看看,不同質量的內切酶,實驗結果大不相同!
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發布者:上海淵達環保科技有限公司
聯系電話:021-33520816
E-mail:sh.yuanda@163.com

標簽: 內切酶
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