冷凍切片機的基本操作:
1.在使用前2小時開啟電源,并將溫度設定在-25℃;
2.將適當大小和厚度的標本放在蘑菇狀杯上,加上冷凍蠟,夾在切片機的固定槽內;
3.準備好玻片,選擇切片厚度,搖動手柄,即可做成切片;
4.將做成的切片小心的吸附在玻璃片上;
5.使用結束后關閉電源,清潔腔體和擦干水氣, 做好使用記錄。
6.為讓水蒸氣蒸發,請不要馬上關閉切片機的上蓋移門,應到第二天再關。如需詳細說明,請借閱說明書。
冷凍切片機的維修與保養:
冷凍切片機是醫院病理科必備的設備,用于手術中提取組織的快速冷凍切片,為手術提供病理依據。冷凍切片機的制冷溫度在-30℃以下,加半導體制冷臺,可使溫度達到-50℃。各種品牌設備的工作原理基本一致,下面以山頓620E型冷凍切片機為例,結合幾種故障介紹其維修保養方法。
故障一: 搖柄與進刀位置不對應,原因:機械傳動部分錯位,維修方法:調整對應位置后再安裝皮帶并擰緊定位卡,在運動摩擦部位加機油潤滑。
故障二: 冷臺溫度顯示錯誤代碼F13、F7操作失靈,原因:冷臺溫度傳感器失效。此傳感器為負溫度系數熱敏電阻,25℃時電阻約為6kΩ,應急使用時可在P5插口上串10K電位器將冷臺顯示溫度調成-40℃,或者直接拔去P5插頭。除冷臺溫度顯示“—”外,其他一切正常,不影響使用。
故障三: 制冷效果降低,原因有二:一是冷凝散熱器散熱不良,二是蒸發器結霜嚴重。處理方法:一是清潔散熱器,可用水沖洗;二是除霜,每停機除霜一次,特別是夏季濕度溫度較高極易結霜盡量減少開門次數。
故障四: 不制冷,該機使用的制冷劑為R502,極易揮發,若制冷系統漏氣R502會在幾天內全部揮發,注意避免使用有腐蝕性的消毒劑清潔機器和消毒房間。制冷系統檢查補漏后加制冷劑R502約600g,壓縮機工作時顯示高壓8.5kg/cm2,低壓0.1kg/cm2。
冷凍切片實驗目的:
1 掌握冷凍切片的方法
2 掌握冷凍切片的用途
實驗原理
冷凍切片是借助低溫使組織凍結達到一定的硬度并通過冰起支撐作用來進行切片的一種方法。
速凍 可減小冰晶直徑,避免組織細胞損傷。
制冷 壓縮機佛里昂制冷、半導體溫差電制冷
實驗材料
新鮮動物肝臟
實驗方法
1 準備 將儀器打開,樣品臺溫度調至-40 ℃。
2 取材 組織必須新鮮,盡可能不經水洗。取材時應避免組織擠壓,防止人為假象 。樣品大小5X5X3mm。
3 速凍 將樣品放在樣品臺上,樣品四周加水加固,冷凍5-10min.
4 切片 升高溫度至-15℃(視樣品而定),約5min后開始切片,厚度6-15um。
5 制片 將切片直接放在載波片上或先放在盛水(固定液)的培養皿中再轉移到載波片上。
6 染色觀察 吸干水,加一滴蘇木精,加蓋玻片,用顯微鏡觀察。
7 記錄 將觀察的結果繪于實驗報告上,整理自己用過的物品。
附:切片溫度的設定
腦 -12℃
肝臟 -14℃
腎臟 -16℃
肌肉 -20℃
皮膚 -25℃
多脂肪組織 -30℃
經過固定的組織 -5℃ ~-10℃
附:快速永久制片
1 固定 70%乙醇5~10min;
2 水洗 2min;
3 蘇木精染色 5~10min;
4 脫色 0.1%HCl 至變紅;
5 藍化0.1NaOH 變藍;
6 水洗 5~10s ;
7 脫水 70% 2min ;
8 伊紅染色 5~10min ;
9 脫水 100%乙醇2minX2;
10 透明 二甲苯 3min;
11 封片 中性樹膠封片。