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【北京總部】biorad伯樂ChemiDoc化學發光成像系統售后維修售后維修服務電話:010-62942350 Western Blot 實驗是蛋白相關研究的常規方法之一。隨著對蛋白研究的深入,研究方向也從原來較為簡單的高豐度蛋白慢慢的轉向低豐度蛋白研究。因此,研究的難度越來越大,對檢測手段的靈敏度也要求越來越高。實驗室中80%的western blot實驗是依靠化學發光作為檢測手段,但用什么方法進行化學發光檢測也決定了研究者是否能看感興趣蛋白,得到的圖像是否能進行準確有效的定量,能不能幫助研究者發現真實的生物學蛋白表達變化。傳統的化學發光檢測方法主要是壓片法,隨著近年來冷CCD技術的興起和成熟,越來越多的實驗室開始采用數字成像系統代替了壓片的技術。伯樂生命醫學產品最近剛剛推出了一款全新的化學發光數字成像系統,ChemiDoc Touch。我們今天就這款成像系統怎樣能幫助研究者輕松拿到感興趣蛋白圖像(甚至超低豐度蛋白),采用什么樣的數據進行定量才更合理可靠采訪了伯樂生命醫學產品的全球產品經理劉寧博士Doctor. Liu。
Doctor Liu:化學發光檢測屬于現有western blot檢測手段中最為靈敏的檢測方法學。但是,決定靈敏度能不能最終能檢測到感興趣蛋白取決于western blot流程中的多重方面,包括樣品上樣量,轉印的效率,抗體的滴度和特異性,化學發光底物的靈敏度和檢測設備的靈敏度等。有時候改進一個或多個方面就有可能大大提升最終的檢測靈敏度。伯樂生命醫學產品一直致力于為western blot 流程提供優質的完整解決法案,從樣品制備到電泳,從轉印到檢測。針對超低級豐度蛋白,伯樂能提供不同的蛋白富集方案,例如我們最近推出的Surebeads 蛋白免疫沉淀磁珠就能幫研究人員大大提高對超低豐度蛋白的檢測。我們能為不同上樣量提供不同的制膠齒梳,為轉印提供更有效快速的轉印方式,為免疫檢測提供高靈敏度的化學發光底物。在不久的將來,我們甚至會推出專用于western blot的檢測抗體,這些抗體經12種不同細胞裂解液的內源性蛋白篩選,具有高滴度和高特異性。另外,我們還剛推出全新一代的高靈敏度化學發光成像系統,ChemiDoc Touch。該成像系統能更有效的幫助研究者們檢測那些以前只能用壓片法才能檢測的低豐度蛋白。
記者:伯樂公司之前就推出過一系列廣受市場用戶好評的成像系統,那么新推出的ChemiDoc Touch 的
Doctor Liu: 從全球市場看來,差不多有40-50%左右的化學發光實驗還采用的是傳統壓片法。具我們所知,有的實驗室會部分實驗采用冷CCD成像系統成像,而部分低豐度難檢測的蛋白還是會換回壓片的方法。從某種角度上講,壓片法的靈敏度和圖像銳利度確實不錯,但它有很大的局限性,特別是在使用的方便程度和檢測的動態線性范圍這塊有所不足。ChemiDoc Touch的定位就是真正幫助那些采用壓片法的研究者們徹底擺脫暗室和繁瑣的反復曝光。Touch 采用新一代的創新的鏡頭和光學組件、超高品質CCD,將數字成像系統的靈敏度和圖像質量真正提高至膠片級別,所以實驗者不用再擔心只能在膠片上才能看到某些極弱條帶。事實上,我們在加州大學的Alpha測試中,客戶用ChemiDoc Touch檢測到了同樣條件下用壓片法無法檢測到的極弱異構體條帶,證明Touch甚至比膠片更為靈敏。此外,ChemiDoc Touch 具有比膠片高1000倍的動態范圍,能得到更準確的蛋白定量效果。因此,我們有自信Touch能給研究者帶來與膠片相媲美的靈敏度和圖像質量,更可靠的定量結果和更簡單便捷的用戶體驗。
記者:這款新的成像系統命名為ChemiDoc Touch是因為它是采用的觸摸屏設計嗎?
Doctor Liu:是的,這款成像系統采用12寸觸摸屏交互控制界面,非常的直觀。我們希望觸摸屏控制軟件的設計足夠簡單,做到即使沒有經過特別培訓用戶也能自行操作。在設計初期,我們將alpha 測試系統放置到不同的壓片實驗室,不做任何培訓讓實驗者根據他們的使用情況提出建議。他們希望軟件界面越簡單越好,能有地方讓不同的用戶看到提醒信息而無需使用便貼條,操作越直觀設置越少越好等。基于不同實驗室提出的這些建議,我們不斷對軟件進行了改進,最終有了現在這版ImageLab Touch 軟件。登錄系統后用戶會發現該軟件界面非常簡潔明了,只需要動動手指縮放成像區域,選擇應用和曝光就能得到實驗者想要的高質量圖像了在電泳結束后將凝膠放到Touch中進行1分鐘激活成像,得到一張類似于考染的圖像,從而判定樣品的質量和分離效果。這就是我們所說的V3中的第一個V,Visualization。在轉印結束后,通過Touch可以在印跡膜上看到膜上免染總蛋白,從而判斷轉印的效率。這是第二個V,Verify Transfer。第三個V是指Validation,也就是我剛剛提到的采用膜上免染總蛋白作為內參來進行定量歸一化。有了這三個V,western流程會更加順暢,定量結果也會更準確穩定。