2025 年 3 月 27 日，歐洲藥品管理局（European Medicines Agency, EMA）發(fā)布了《Guideline on the quality aspects of mRNA vaccines》，該指南適用于傳染病預(yù)防用 mRNA 疫苗，核心內(nèi)容包括制造工藝控制、產(chǎn)品特性分析、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定、分析方法控制及原材料/活性成分/成品的定義等 5 個(gè)版塊。

隨著 EMA 新規(guī)的發(fā)布，mRNA 疫苗質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)再度升級(jí)。指南特別強(qiáng)調(diào)了藥物開發(fā)過程中質(zhì)量控制的重要性，并以明確定義的質(zhì)量目標(biāo)產(chǎn)品概況（quality target product profile, QTPP）為指導(dǎo)，并從中得出關(guān)鍵質(zhì)量屬性（critical quality attributes, CQA）。以下是與藥物開發(fā)相關(guān)的屬性列表，明確每個(gè)屬性是否被認(rèn)定為 CQA，是否被界定為典型的質(zhì)量屬性，和/或是否被提及為需要表征的產(chǎn)品或工藝相關(guān)雜質(zhì)：

值得注意的是，指南明確提出需要對(duì) mRNA 疫苗的 LNP 粒徑、mRNA 包封率、游離 mRNA 含量及 LNP 空殼等關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行表征。

• LNP 粒徑：影響 mRNA 疫苗的生物分布與遞送效率
• LNP 空殼：空載 LNP 被認(rèn)為是雜質(zhì)，可能降低疫苗效力
• mRNA 包封率：確保 mRNA 被有效包裹及有效遞送
• 游離 mRNA 殘留：可能引發(fā)非預(yù)期免疫反應(yīng)，需控制

傳統(tǒng)的檢測(cè)方法（如電鏡、動(dòng)態(tài)光散射）往往只能提供單一參數(shù)，且無法區(qū)分空載的 LNPs 與 mRNA LNP。NanoFCM（單分子納米生物檢測(cè)儀）基于其高靈敏特性，開發(fā)了 mRNA LNP 多維表征方案，恰好填補(bǔ)了這一領(lǐng)域的技術(shù)空白——僅需一臺(tái)設(shè)備，即可同步完成四大核心質(zhì)量指標(biāo)的精準(zhǔn)檢測(cè)。

mRNA 疫苗質(zhì)控的“全能選手”
NanoFCM 基于單顆粒水平檢測(cè)技術(shù)，可在1分鐘內(nèi)完成以下關(guān)鍵分析：

1、粒徑與濃度檢測(cè)
無需標(biāo)記，直接測(cè)量 LNP 的粒徑分布和顆粒濃度，確保滿足 EMA 要求的均一性標(biāo)準(zhǔn)。

2、空載 LNP
通過核酸染料標(biāo)記，區(qū)分裝載 mRNA 的 LNP（紅色）與空載 LNP（藍(lán)色），通過這一數(shù)據(jù)結(jié)果，指導(dǎo)工藝優(yōu)化，進(jìn)一步降低空載 LNP 比例，提升疫苗的純度。

3、mRNA 拷貝數(shù)和包封率
基于 NanoFCM 對(duì)單個(gè) mRNA 分子的高靈敏檢測(cè)，在單次檢測(cè)中同步識(shí)別游離 mRNA 和 mRNA LNP，通過儀器自身配套的專業(yè)分析軟件即可快速獲得單個(gè) LNP 內(nèi)包裹 mRNA 的拷貝數(shù)，進(jìn)一步結(jié)合游離 mRNA 的定量分析即可獲得包封率。

4、多組分鑒定
基于 NanoFCM 散射和熒光雙觸發(fā)的特性，可快速實(shí)現(xiàn)成功裝載 mRNA 的 LNP（紅色）、未裝載 RNA 的 LNP 空殼（藍(lán)色）及游離的 mRNA（橙色）等組分的快速鑒定。