2021年2月26日，國際學術期刊Science在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心（生物化學與細胞生物學研究所）周斌研究組的研究成果“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。在該項研究中，他們建立了一種檢測細胞增殖的新技術—ProTracer（Proliferation Tracer）。該技術具有長時間不間斷檢測細胞增殖的能力，可以特異性地標記某種特定細胞譜系的細胞增殖，并且實現了不犧牲樣品直接活體檢測細胞增殖，從多個維度刷新了細胞增殖檢測的能力和范圍，可以廣泛應用于不同組織器官細胞增殖的檢測，為發育生物學、腫瘤學、神經科學和再生醫學等眾多領域的研究提供強大技術支撐。研究人員利用ProTracer技術發現了成體肝細胞的來源，為肝臟再生及疾病臨床治療研究提供了新思路。

該文中的肝臟樣本采用了SHIELD方法進行組織透明化，并使用锘海LS18光片顯微鏡對樣品進行3D成像。


LS18 light-sheet microscopic image showing donut-like tdTomato signals in liver

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SHIELD—新一代組織透明化及免疫熒光標記解決方案

SHIELD是基于CLARITY的改進方法，研究者從蛋白質構象保護出發，從上百種化學試劑中篩選出了P3PE，其環氧化作用很好的保護了組織內源性蛋白質、熒光蛋白，同時具有降低自發熒光等優異性能，SHIELD方法代替了原有的丙烯酰胺固定,摒棄了凝膠包埋的步驟，固定完的樣品可直接進行透明化。SHIELD技術可實現腦、心、肝、脾、肺、腎、腸和脊髓等多種組織器官的透明化，比被動式透明化快一個數量級（數天VS數周）。對蛋白結構及熒光的保存可達數周的穩定性。

1.SHIELD固定試劑（锘海代理）

• 操作簡便，無需包埋步驟
• 凝膠單體交聯條件溫和
• 優異的蛋白、核酸、熒光等的保護作用

2.SmartClear II Pro 全自動組織透明化系統（锘海代理）

• 一鍵式簡易操作，高效組織透明化
• 保護組織結構以及熒光信號完整
• 適用于腦、心、肝、脾、肺、腎、腸和脊髓等多種組織器官的透明化

13.SmartLabel 主動式熒光標記系統（锘海代理）

• 一鍵式簡易操作，高效、均勻的免疫染色
• 保護組織結構以及熒光信號完整
• 適用于對完整大腦、心臟、脊髓等多種組織器官的免疫染色

锘海LS18光片顯微鏡—專為透明化樣品設計的高速高分辨三維熒光顯微鏡成像系統


針對大組織樣品的3D熒光成像，采用與西湖大學高亮（平鋪光片技術發明人）實驗室共同研制的光片顯微鏡Nuohai LS 18，其運用創新的平鋪光片技術，克服了傳統光片顯微鏡中空間分辨率、光學層析能力和成像視野大小之間的矛盾，從而獲得均勻高分辨率的3D熒光圖像，廣泛應用于腦科學、腫瘤學、藥物研發、干細胞研究、組織胚胎學、組織病理診斷等各個領域。

適用于各種透明化樣品：
Ø 水性透明化方法：SHIELD, CLARITY，CUBIC等
Ø 有機溶劑透明化方法：PEGASOS，3/i/uDISCO，AdipoClear，Visikol等


應用方向：
Ø 神經科學/發育生物學/腫瘤學/免疫生物學/病理學/生殖醫學/動物器官3D成像（腦，腎，肺，骨骼，乳腺等）/組織工程學和類器官/藥效評價

锘海一站式科研服務——讓科研變得更簡單
組織透明化技術和光片熒光顯微技術的發展，使研究者能從宏觀到微觀對生物組織內部的結構及生理、病理特征進行觀察和功能性分析。锘海生物科學儀器（上海）股份有限公司提供完整器官的組織透明化、組織免疫熒光染色、高分辨3D顯微成像以及大數據分析一體化服務，旨在通過精準、快速、多樣化的一站式科研服務為每一位生命科學工作者提供個體化/定制化的解決方案。