圖1. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)助力高水平論文發(fā)表
 

自組裝蛋白納米顆粒擁有高度均一的結(jié)構(gòu)、良好的生物相容性和極好的可塑性等天然性優(yōu)勢，越來越廣泛和深入地被設(shè)計改造，用于整合佐劑和抗原，以激發(fā)持久有效的免疫應(yīng)答。然而，基于表面修飾功能化納米顆粒有兩個常見問題：（1）負(fù)載物時常引起納米顆粒解聚；（2）抗原與佐劑難以用傳統(tǒng)的基因融合技術(shù)共遞送。該論文報道了一種基于內(nèi)涵肽介導(dǎo)的反式剪接方法，克服了負(fù)載蛋白對鐵蛋白納米顆粒穩(wěn)定性的不利影響，并允許在同一個納米顆粒表面以一種便捷、高效、特異的方式共展示抗原和佐劑。該研究以一種表位抗原為模型，揭示了抗原和佐劑共給藥納米顆粒比其他劑型可誘導(dǎo)更為高效的保護性免疫。實驗結(jié)果表明蛋白質(zhì)編輯可作為一種應(yīng)用前景廣闊的技術(shù)共遞送抗原/佐劑以增強抗原相關(guān)免疫應(yīng)答。

上海巴斯德研究所錢志康課題組聯(lián)合博后湯書兵老師使用上海閃譜生物科技有限公司ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)從反應(yīng)后溶液中高效純化分離出了多種不同功能的嵌合型納米顆粒，其中包括納米疫苗SP70-HFT（圖2、3）、納米佐劑rhizavidin-HFT（圖4、5；rhizavidin為單體抗生物素蛋白，用以結(jié)合生物素化的CpG）、共遞送納米顆粒（圖6、7）SP70/rhizavidin-HFT等，并比較了它們對免疫反應(yīng)的影響，發(fā)現(xiàn)抗原/佐劑共輸送的納米顆粒SP70/CpG-HFT可增強與抗原偶聯(lián)的免疫反應(yīng)。以下結(jié)果為本論文中利用ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)純化的不同功能的納米顆粒和ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)。

 

圖2. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上基于凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70 /HFT的UV圖譜（摘自Figure 3d）

圖3.  Tricine-SDS-PAGE檢測凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米疫苗SP70-HFT (摘自Figure 3c)


圖4. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S5h）


圖5. Tricine-SDS-PAGE檢測凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化納米佐劑rhizavidin-HFT（摘自Figure S5g）

       圖6. 在閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)上，基于凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT的UV圖譜（摘自Figure S6b）


圖7. Tricine-SDS-PAGE檢測凝膠過濾法從反應(yīng)后溶液中分離純化共遞送納米制劑SP70/rhizavidin-HFT (摘自Figure S6a)

圖8. 閃譜ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)
 

該文章一經(jīng)發(fā)表便引起整個行業(yè)的廣泛關(guān)注，文章影響因子高達12.2分。上海巴斯德研究所錢志康老師和博后湯書兵老師是本次研究課題隊伍的核心人物。湯書兵老師研究方向是開發(fā)全新的模塊納米顆粒遞進技術(shù)，用于疫苗研發(fā)、個性化腫瘤治療等，致力于推動人類生命健康發(fā)展，不斷地進行科學(xué)技術(shù)攻關(guān)。

 

圖9. 文章作者湯書兵老師
 

錢志康老師1996年7月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生物化學(xué)系，獲學(xué)士學(xué)位；2005年1月畢業(yè)于復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，獲博士學(xué)位。2005年6月至2012年3月在美國華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物系先后為博士后，研究員（Staff scientist）。現(xiàn)任中國科學(xué)院上海巴斯德研究所皰疹病毒分生物學(xué)研究組組長，研究員，博士生導(dǎo)師。 從事人類重要病毒學(xué)研究十余年，主要工作集中在人巨細(xì)胞病毒（HCMV）的分子生物學(xué)及其與宿主相互作用的研究，已在Journal of Virology, PLoS Pathogens 等權(quán)威國際學(xué)術(shù)刊物上發(fā)表論文10余篇，申請專利6項，獲授權(quán)專利4項。近五年承擔(dān)了國家自然科學(xué)基金、國家科技部重大專項，國家重大基礎(chǔ)研究，中科院重點項目，是美國微生物協(xié)會和病毒學(xué)協(xié)會會員。

 

圖10：文章作者錢志康老師
 

本次課題研究使用的是上海閃譜生物科技有限公司的ClearFirst-3000型蛋白純化系統(tǒng)，該儀器主要應(yīng)用于大型生命科學(xué)實驗室的蛋白純化工作，與傳統(tǒng)方法相比，極大提高了純化工作的效率，節(jié)約大量的人力物力。上海閃譜生物科技有限公司是國內(nèi)知名分析儀器公司投資的，以留學(xué)人員為主體的高科技公司，專注于蛋白純化系統(tǒng)和酶標(biāo)儀等生命科學(xué)儀器的研發(fā)生產(chǎn)，致力于為生命科學(xué)工作者提供優(yōu)質(zhì)的科學(xué)儀器。上海閃譜生物科技有限公司與廣州市婦女兒童醫(yī)療中心和中科院巴斯德研究所共同合作促進了本次課題研究的成功，以后上海閃譜會繼續(xù)提供優(yōu)質(zhì)的生命科學(xué)儀器，為推動中國的生命科學(xué)研究不斷進步！