MD講座:自動化高通量平臺蛋白表達體系中優化及篩選
瀏覽次數:5028 發布日期:2016-9-12
來源:本站 本站原創,轉載請注明出處
在酶的定向進化 、組合合成生物學、微生物表面展示技術及高通量克隆構建等技術領域中,如何能做到高通量快速挑選克隆以提高工作效率?QPix微生物自動化高通量篩選平臺可幫助實現省時省力。
本講座將介紹其在蛋白質科學方面一種新的應用----高通量快速篩選蛋白質的可溶性表達條件,為進一步的生物化學、結構學研究打下基礎。
工作流程:
1、運用C端融合表達二氫葉酸還原酶(DHFR)的載體系統高通量的篩選具有正確讀碼框的隨機PCR克隆質粒
2、運用分段式的GFP熒光活性篩選系統快速分選出細胞內有目標蛋白可溶性表達的克隆
3、運用體外熒光篩選技術區分出可溶性蛋白表達量的高低。
圖1 運用QPix進行高通量蛋白可溶性篩選整體流程示意圖
圖2 結合CloneSelect Imager觀察熒光強弱

運用這種方法可以快速高通量判斷蛋白可溶性的強弱
日期:2016年9月22日,周四
時間:10:00-11:00(北京時間)
主講人:鄧瑋博士 國家蛋白質科學中心 規模化蛋白質制備系統運維主任
1999-2003年 武漢大學化學與分子科學學院 本科
2003-2008年 中科院上海有機化學研究所 生命有機化學博士,從事天然產物生物合成研究
2008-2012年 美國密西根大學生化系雷鳴教授課題組從事DNA損傷修復途徑中重要復合物SOSS的功能及結構研究,成功解析了多個重要復合物結構并進行相關功能研究獲得重要發現。
2012年-至今 國家蛋白質科學中心,擔任規模化蛋白質制備系統主任,從事自動化高通量生物科學實驗研究工作,參與設計了多套自動化生物科研系統,并進行相關科研應用開發。