傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加胎牛或小牛血清組成。血清是一種含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需生長(zhǎng)因子的補(bǔ)充劑。而血清制品的定義不明確的性質(zhì)對(duì)于下游研究和治療應(yīng)用是不可取的,并且存在批次間差異。同時(shí),血清可能含有細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子和毒性因子,存在潛在毒性,血清的獲取成本高。血清由于成分不完全明確,給細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化帶來(lái)困難,同時(shí)也給細(xì)胞表達(dá)目的產(chǎn)物純化等下游操作帶來(lái)困難。為了克服與血清相關(guān)的不一致性能,無(wú)血清培養(yǎng)基是絕對(duì)必要的。
細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基通常含有多種維生素、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、激素、生長(zhǎng)因子以及結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等,部分培養(yǎng)基包含動(dòng)物來(lái)源或微生物重組表達(dá)的細(xì)胞外基質(zhì)。
轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于確保足夠的細(xì)胞增殖和功能至關(guān)重要,對(duì)于絕大部分細(xì)胞系在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是必需的,為絕大多數(shù)無(wú)血清培養(yǎng)基必需添加物組分,通過(guò)與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TFR) 相互作用,在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮重要功能。轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三價(jià)鐵離子可逆性結(jié)合,調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝,維持細(xì)胞內(nèi)的鐵以及鉻、錳、鎘、鎳等多種金屬離子的平衡穩(wěn)態(tài)?删S持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,有類似于生長(zhǎng)因子的功能。而且,轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細(xì)胞受到傷害。
總而言之,轉(zhuǎn)鐵蛋白是無(wú)血清培養(yǎng)體系中的重要成分,研究表明飽和鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)是最有效的形態(tài)。對(duì)于雜交瘤,黏連細(xì)胞和懸浮細(xì)胞系,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)保持培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針對(duì)不同的細(xì)胞系,需要選擇最合適的濃度。
近日,禾元生物推出了新品——水稻重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白。禾創(chuàng)TMOsrhTF是一種來(lái)源于水稻胚乳細(xì)胞的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白,主要用于細(xì)胞培養(yǎng)。與天然提取來(lái)源的轉(zhuǎn)鐵蛋白相比,禾創(chuàng)TMOsrhTF避免了來(lái)自于人源或動(dòng)物源病毒及支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)。
規(guī)格參數(shù)
來(lái)源:水稻種子
外觀:粉紅色至紅褐色或橘紅色粉末或晶體粉末
純度:≥95%(RP-HPLC)
pH值:6.0~8.0
內(nèi)毒素:≤1EU/mg
分子量:75kD
鐵飽和度:70%
主要優(yōu)勢(shì)
應(yīng)用案例
圖1:與其他市售rhTF相比,在低血清測(cè)試體系下,禾創(chuàng)具有更佳的生物學(xué)活性
圖2:禾創(chuàng)(右)和其他市售rhTF(左)在MSC細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)對(duì)比
圖3:與未添加TF相比,禾創(chuàng)能明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖,并且與其他市售rhTF相比,增殖效果相當(dāng)。
無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)系列產(chǎn)品
OsrHSA——水稻重組人血清白蛋白
OsrhFN——水稻重組人纖維連接蛋白
OsrhbFGF——水稻重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子
OsrhVEGF——水稻重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子
OsrhKGF——水稻重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子
rhIGF-1 LR3——重組人類胰島素生長(zhǎng)因子-1 LR3
rhEGF——重組人表皮生長(zhǎng)因子
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