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SmartCycler II : 真正“聰明”的定量PCR儀

瀏覽次數:6486 發(fā)布日期:2009-3-25  來源:本站 本站原創(chuàng),轉載請注明出處

SmartCycler II是世界上獨一無二的能勝任多任務平行操作的定量PCR儀。她有方正的外觀,小巧的配件,精致的薄壁管,一切一切都是如此的出挑,甚至連為她專門優(yōu)化的試劑都彰顯著與眾不同——那居然是一顆顆躍動的小珠!


與其它常見的定量PCR儀不同,SmartCycler II在設計上更為合理與體貼。相信我們大多數人都碰到過這樣的苦惱:實驗室里幾個研究人員,不同的課題都需要使用儀器,有時就不得不犧牲一下自己的實驗安排和進度了。而SmartCycler II就可以完全解決這樣的麻煩。她采用16個I-CORE模塊(圖2)的設計,每個模塊都集成有自己的加熱/冷卻系統以及光學信號激發(fā)與檢測系統,每個模塊都可以獨立的操控和運行,因此一臺SmartCycler II其實就相當于16臺獨立的定量PCR儀。不同實驗條件的樣品可以在一臺儀器上同時擴增,也可以在一組樣品的實驗過程中,隨時在其它空置的模塊上開始運行其它的實驗。這樣的設計,保證了儀器能夠被最高效的使用,而且,由于一套控溫系統只服務于一只反應管,因此升降溫速度都非常快:升溫速度可達10℃/s,降溫也達到了2.5℃/s,通常要大約2小時才能完成的一輪45個循壞的兩步法定量PCR實驗,在SmartCycler II上只需要45分鐘就夠了。多任務操作的靈活性結合系統的快速,賦予了SmartCycler II更高的有效通量,也保證了儀器能夠得到最充分的使用。

這種靈活性在我們優(yōu)化實驗條件時更顯得重要。舉個簡單的例子,在以前,如果我們對退火溫度和時間各做4個梯度,就需要16輪2小時的實驗后才能匯總所有的結果進行比較,現在有了SmartCycler II,只需不到一個小時!而一個實驗的條件優(yōu)化,往往還牽涉到反應體系中引物及探針(或染料)的濃度選擇等等,林林總總,SmartCycler II可以為我們節(jié)約多少寶貴的時間啊!

而且,SmartCycler II的靈活性及快速,是建立在保證實驗數據的可重復性和盡可能寬的線性范圍的基礎之上的。獨立的模塊式設計,使得系統中反應管的實際溫度,只受一個因素的影響,即模塊的控溫精度(<±0.5℃);而傳統的板式設計,除了整塊板的控溫精度之外,還必須考慮一塊樣品板上不同位置之間的差異,即我們通常所說的“邊緣效應”。因此,除了個別離心式設計的系統之外,SmartCycler II的實驗重復性表現,不遜于其它任何系統。不妨讓我們來看看實際的實驗數據吧:用TxR/BHQ2標記的探針對一段71bp的DNA片段進行定量的結果,9組樣品從109個拷貝到10個拷貝,以10倍為一個梯度,每一個梯度做3次重復,圖3顯示的就是實驗的結果。我們可以看到,每一個梯度的3次重復結果都相互吻合得非常好(Cv<0.55%),而且在數量及這樣一個很寬的線性范圍內,都可以獲得線性很好的數據(標準曲線的r2>0.99)。


SmartCycler II之所以能夠達到9個數量級的線性監(jiān)測范圍,源于高性能的光學系統。每一個獨立的I-CORE中,都整合有4個不同波長的LED激發(fā)光源和4個相應波長的光電檢測器,經過系統優(yōu)化,可以有效的進行光譜分離。4通道的設計,使得我們在實驗設計過程中可以自由的選擇合適的熒光染料,無論是成本低廉的SYBR Green,還是特異性更好的TaqMan或分子信標探針,都可以使用;還可以選擇多重定量實驗,對于經常需要做相對定量的您而言,是不是非常方便呢?

SmartCycler II的軟件操作也非常方便,三級菜單設計,簡單明了,即便是初學者,不消一個小時也可以熟練操作了。而且,SmartCycler II的全固件設計,使它擁有了極好的抗震性能,不但能夠實時,甚至還能夠完成實地定量,因此,推出短短時間,就在疾病預防和控制,農林畜牧業(yè)的病蟲害防治以及生物反恐等領域大放異彩。系統的通量可以非常容易的擴展到96個樣品,在科研領域也得到了廣泛的認可。Cepheid公司出品的SmartCycler II已成為目前全美市場年銷量第三的著名品牌。

心動不如行動!快來和我們一起加入 “聰明”定量之旅,共同享受SmartCycler II帶來的實驗樂趣吧!

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