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天根生化科技(北京)有限公司產(chǎn)品促銷(xiāo)活動(dòng)

瀏覽次數(shù):14376 發(fā)布日期:2006-2-24  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處
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活動(dòng)時(shí)間:即日起至2006年4月30日

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禮品贈(zèng)送:
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產(chǎn)品名稱(chēng)

參照片段

產(chǎn)品包裝

價(jià)格

MD100系列:由單一DNA條帶(PCR產(chǎn)物或者單一酶切產(chǎn)物)混合而成。6ul上樣,普通條帶約50ng,加亮條帶約100ng

Marker Ⅰ

100200300400500600

50/200

90/300

Marker Ⅲ

2005008001200200030004500

500 bp ladder

5001000150020002500300035004000

1 kb ladder

1000200030004000500060007000800010000

D2000

10025050075010002000

D15000

25010002500500075001000015000

50 bp ladder

50100150200250300350400450

160/600

100 bp ladder

10020030040050060070080090010001500

200 bp ladder

100200300400500700100016002000500080001000

1 kb plus ladder

20040060080010001200140016001800200022004000

D150002000

100250500750100020002500500075001000015000

MD200系列(即用型):單一質(zhì)粒或者噬菌體DNA經(jīng)單個(gè)內(nèi)切酶完成消化,加熱滅活而成。每次上樣總DNA含量已知,可以計(jì)算得到每條帶的含量。

λDNA/EcoRⅠ

3530487856435804742121226

50/200 μg

90/320

λDNA/HindⅢ

1265642027232243616557941623130

pUC18/MspⅠ

346789110147190242353404489501

10/50 μg

90/380

pBR322/HaeⅢ

5157648089104123124184192213234267434502540587

pBS/HaeⅢ

507980102125142174254267434458767

pBR322/MspⅠ

2634677690110123147160180190201217238242309404527622


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DNA Marker產(chǎn)品選擇指南
Marker選擇標(biāo)準(zhǔn)
1、應(yīng)選擇在目標(biāo)片段大小附近ladder較密的marker,這樣對(duì)目標(biāo)片段大小的估計(jì)較準(zhǔn)確。
2、所選marker應(yīng)能清楚反映目標(biāo)片段的大小,且次要片段大小也能反映出來(lái)。如作酶切鑒定時(shí),目的片段和切后載體片段最好能在同一個(gè)marker中反映出來(lái),若二者不能兼顧,將前者作為主要考慮要素。

操作示例

目錄號(hào):MD114

6 μl加樣,

凝膠長(zhǎng)度10 cm

電壓8 v/cm

0.5´TBE Buffer

1、產(chǎn)品說(shuō)明

本產(chǎn)品為即用型產(chǎn)品,已含有1×Loading Buffer,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,直接取3-6 μl電泳,使用方便,電泳圖像清晰。

本產(chǎn)品中六條帶分別為20001000750500250100 bp,若上樣量為6 μl,則 750 bp帶約為100 ng,其余帶約為50 ng

2、使用方法

1) 3-6 μl本產(chǎn)品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中(每1mm點(diǎn)樣孔寬度加1 μl,如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量),進(jìn)行電泳。注意:建議電泳條件為1.0-2.5%瓊脂糖凝膠,電壓4-10 v/cm

2) 電泳完畢,通過(guò)EB染色,在紫外燈下觀察電泳條帶。

目錄號(hào):MD202

6 μl加樣,

凝膠長(zhǎng)度10 cm

電壓8 v/cm

0.5´TBE Buffer

1、產(chǎn)品說(shuō)明

本產(chǎn)品是由λDNA經(jīng)Hind完全酶切得到的,包括2313094166557436123222027564125 bp DNA片段,適用于瓊脂糖凝膠電泳中DNA條帶的定量分析。

本產(chǎn)品為即用型,已含有1×Loading Buffer

2、使用方法

1) 5 μl產(chǎn)品, 65℃加熱5分鐘,冰浴3分鐘,進(jìn)行電泳。

注意:建議電泳條件為1.0-2.5%瓊脂糖凝膠,電壓4-10 v/cm;使用本產(chǎn)品前必須加熱5分鐘,以防λDNAcos位點(diǎn)復(fù)性。

2) 電泳完畢,通過(guò)EB染色,在紫外燈下觀察電泳條帶。

 


DNA Marker電泳常見(jiàn)問(wèn)題分析
Q:為什么marker條帶非常模糊,無(wú)法辨別具體條帶?
A:出現(xiàn)上述情況,可能有以下幾個(gè)原因:1. marker條帶出現(xiàn)了降解。請(qǐng)確保在使用過(guò)程中避免核酸酶污染;2. 電泳緩沖液陳舊。電泳緩沖液多次使用后,離子濃度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;3. 電泳條件不合適。電泳時(shí)電壓應(yīng)不超過(guò)20V/cm,溫度應(yīng)低于30℃;4. marker上樣量過(guò)多。請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書(shū)選用合適上樣量;5. 凝膠質(zhì)量不好。建議使用質(zhì)量較好的瓊脂糖;此外,凝膠凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致條帶模糊。

Q:為什么marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則的條帶(如啞鈴狀等)?
A:出現(xiàn)上述情況,多與以下幾個(gè)原因有關(guān):1. 電泳緩沖液陳舊。老化的電泳緩沖液離子濃度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;2. 電泳條件不合適。電泳時(shí)電壓應(yīng)不超過(guò)20V/cm,電壓太高可能也會(huì)導(dǎo)致marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則現(xiàn)象。此外,凝膠質(zhì)量差以及凝膠冷卻時(shí)凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致該現(xiàn)象出現(xiàn)。

Q:為什么marker條帶非常弱或者根本沒(méi)有條帶?
A:出現(xiàn)上述情況可能是:1. marker上樣量較低,可適當(dāng)增加上樣量;2. 凝膠質(zhì)量較差或凝膠凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致電泳條帶弱或根本沒(méi)有條帶;3. 電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致marker條帶跑出凝膠,可縮短電泳時(shí)間,降低電壓,增加凝膠濃度。

Q:為什么marker缺帶?
A:對(duì)于含有較小片段的marker,如果出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象,可能是因?yàn)椋?. 小條帶跑出凝膠或分子量大小非常相近的條帶不易辨認(rèn)所致,可適當(dāng)縮短電泳時(shí)間,降低電壓,同時(shí)增加凝膠濃度;2. 凝膠中EB含量過(guò)低,導(dǎo)致大片段結(jié)合EB量太少或沒(méi)有,在紫外光下亮度太低,可適當(dāng)增加EB用量。

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